CIK細胞聯(lián)合?？颂婺釋Ψ蜗侔┘毎档募毎拘?yīng)研究.pdf

1、背景
　　據(jù)統(tǒng)計,肺癌在我國惡性腫瘤的死因中占首位,嚴重影響著國人的生命健康。其中,非小細胞肺癌據(jù)是肺癌中最為常見的類型,約占其80％～85%。由于缺乏早期有效的檢查手段和篩選,致使我國80%的肺癌病人在發(fā)現(xiàn)和確診時已屬晚期,錯失了最佳的治療時間和治療手段。手術(shù)是癌癥患者的首選;對已不具備手術(shù)指征的患者而言,放、化療亦是非常重要的治療方法。但近年來,由于手術(shù)的不徹底性,化療的多重耐藥和放療的低敏感性,使得臨床治療效果均不佳。在人們

2、的積極探索下,腫瘤生物治療應(yīng)運而生,成為腫瘤綜合療法的第四種治療模式。其中,細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokine-inducedkiller,CIK)是腫瘤過繼免疫療法的主要效應(yīng)細胞,成為研究的熱點。CIK細胞通過調(diào)動及增強患者的免疫功能,從而達到殺滅腫瘤細胞并防止其轉(zhuǎn)移復發(fā)的目的,改善了腫瘤患者的預后,使患者的生存質(zhì)量得到很大程度的提高。另外,近年來針對細胞受體和調(diào)控分子、關(guān)鍵基因為靶點的靶向治療也得到了很好的研究和發(fā)展。在肺癌中

3、,人們研究最多的是EGFR(表皮生長因子受體)基因,由此針對該基因研究產(chǎn)生的EGFR-TKI(表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑),如厄洛替尼、吉非替尼等,在臨床上取得了相當好的成效?，F(xiàn)階段,腫瘤的治療強調(diào)一個有效的綜合治療模式。本實驗通過CIK細胞和國產(chǎn)的EGFR-TKI(Icotinib)聯(lián)合作用,在體外對肺腺癌細胞系的殺傷實驗,研究兩種方法的可行性及有效率,為臨床上肺癌的綜合治療提供指導意義。
　　目的
　　研究并觀察C

4、IK細胞療法和不同濃度下的鹽酸埃克替尼(Icotinib)對肺腺癌細胞系:PC9細胞(表皮生長因子受體突變型的細胞)和A549細胞(表皮生長因子受體野生型的細胞)的體外細胞毒效應(yīng)。
　　方法
　　以體外培養(yǎng)的PC9細胞及A549細胞分別為靶細胞,將實驗分為四組:CIK細胞單獨組、3種不同濃度的鹽酸?？颂婺釂嗡幗M、CIK細胞+不同濃度下的?？颂婺崧?lián)合組和空白對照組(即單獨的靶細胞組)。
　　(1)CCK8試劑盒檢測CIK

5、細胞和埃克替尼分別及聯(lián)合應(yīng)用對PC9細胞和A549細胞的體外生長抑制作用;
　　(2)AnnexinV-FITC試劑盒利用流式細胞儀檢測CIK細胞和?？颂婺釋煞N靶細胞凋亡作用的影響;
　　(3)用MTT法檢測鹽酸埃克替尼分別對兩種靶細胞的IC50值。
　　結(jié)果：
　　1CIK細胞對兩種靶細胞殺傷作用的比較CCK8法及流式檢測法對PC9細胞及A549細胞的殺傷率及凋亡率相當,CIK對兩種靶細胞之間的細胞毒效應(yīng)無顯

6、著差別(P>0.05),說明CIK細胞對肺癌細胞的殺傷具有有效性。
　　2CIK細胞聯(lián)合Icotinib組與各單獨組的比較CCK8殺傷和AnnexinV-FITC凋亡實驗可觀察:CIK細胞+?？颂婺崧?lián)合組對靶細胞的體外殺傷作用均明顯高于各單獨治療組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01))。
　　3PC9細胞和A549細胞之間的比較從實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析:聯(lián)合組和?？颂婺釂为毥M對PC9細胞的殺傷率及凋亡率均高于A549組,聯(lián)合組對PC

7、9細胞的殺傷率可達65.85±1.44%,A549細胞的聯(lián)合殺傷率達52.92±1.57%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05));
　　4兩種細胞的IC50值比較鹽酸?？颂婺釋C9及A549細胞作用48h后的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為:0.21±0.03μmol/L、4.79±0.74μmol/L,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),說明EGFR-TKI的靶向藥物對EGFR基因突變的腫瘤細胞效果更優(yōu)。
　　結(jié)論