基于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路探討缺硒雞腦細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、硒作為人和動(dòng)物不可缺少的一種微量元素，在機(jī)體發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用。缺硒能夠損傷多種組織及器官，從而引發(fā)很多疾病。腦作為缺硒的一種靶器官，其損傷不容忽視。硒缺乏能夠誘導(dǎo)雞腦細(xì)胞凋亡。但目前對(duì)于缺硒引起肉雞出現(xiàn)滲出性素質(zhì)直至死亡期間，其腦組織損傷變化的研究缺乏詳細(xì)報(bào)道。故本實(shí)驗(yàn)選用一日齡肉雞180只，將其隨機(jī)分為兩組:正常組(C組，硒含量為0.282mg/kg)和缺硒組（L組，硒含量0.033mg/kg）。飼養(yǎng)至16～35日齡期間，出現(xiàn)滲

2、出性素質(zhì)時(shí)剖殺，對(duì)雛雞腦組織進(jìn)行采樣（大腦灰質(zhì)、大腦白質(zhì)、小腦、丘腦、腦干）。觀察腦組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)病理變化，并利用qPCR檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(GRP78、GRP94、IRE-1、XBP1、ATF4、ATF6、CHOP、EROlα)、鈣穩(wěn)態(tài)(CAPN1、IP3R、RYR3、SERCA)及凋亡(Caspasel2、Caspase3)等相關(guān)基因的mRNA水平。同時(shí)利用Western Blot對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(GRP78、CHOP)及凋亡(Caspa

3、se12、Caspase3)相關(guān)蛋白水平進(jìn)行檢測(cè)。旨在探討缺硒引起雞出現(xiàn)滲出性素質(zhì)時(shí)，腦組織各區(qū)的損傷情況以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在腦組織細(xì)胞凋亡中扮演的重要角色。研究結(jié)果如下:
　　(1)硒缺乏性滲出性素質(zhì)雞的不同腦區(qū)超微結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)不同程度的病理變化:核膜皺縮，核濃縮，染色體聚集，邊緣化;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯減少，甚至出現(xiàn)大量的空泡化，另外伴隨線粒體斷裂甚至消失;
　　(2)硒缺乏能夠上調(diào)滲出性素質(zhì)雞腦組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因

4、(GRP94、IRE-1、XBP1、ATF4、ATF6、CHOP、EROlα)的mRNA水平，并使GRP78的mRNA水平和蛋白水平顯著升高。其中，丘腦及腦干變化最為顯著，結(jié)果表明缺硒性滲出性素質(zhì)雞腦組織發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激并激活下游凋亡信號(hào)通路;
　　(3)硒缺乏引起腦組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白IP3R、RYR3及CAPN1的mRNA水平顯著升高，提示缺硒能夠破壞滲出性素質(zhì)雞腦組織鈣穩(wěn)態(tài)而影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而損傷腦組織;
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