內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與胰島β細(xì)胞脂毒性的研究.pdf

1、研究背景與目的：胰島素抵抗與胰島功能衰竭是糖尿病發(fā)病的兩個(gè)中心環(huán)節(jié)，但究竟是前者還是后者更重要一些目前尚有較大爭(zhēng)論。已有大量研究提示胰島素抵抗可能在西方人群的糖尿病發(fā)生中處于主導(dǎo)地位，而胰島功能衰竭在東亞人種的糖尿病發(fā)病中可能具有更重要的意義。2型糖尿病患者胰島功能衰竭可能主要由糖毒性和脂毒性導(dǎo)致的胰島β細(xì)胞凋亡增多引起；作為一種更理想的解釋?zhuān)鼇?lái)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)β細(xì)胞的影響引起了更多的關(guān)注。首先本研究報(bào)道了在正常糖耐量中國(guó)人中糖負(fù)荷后1小

2、時(shí)血糖達(dá)11.1mM以上人群的代謝特點(diǎn)，探討了早期胰島素釋放功能衰竭意義和可能的原因，發(fā)現(xiàn)脂代謝異常與胰島功能損害相關(guān)；其次，建立高脂誘導(dǎo)肥胖大鼠模型，探索高脂血癥狀態(tài)下胰島細(xì)胞是否存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，并觀(guān)察其胰島形態(tài)功能的變化；3)體外條件下，利用軟脂酸長(zhǎng)期孵育觀(guān)察細(xì)胞凋亡和增殖的情況，進(jìn)一步驗(yàn)證胰島細(xì)胞脂毒性和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的聯(lián)系。 材料與方法：1)2549名受試者接受OGTT試驗(yàn)。對(duì)比其中非糖尿病人伴1小時(shí)血糖≥11.1mmol/

3、l者與正常糖耐量者，糖耐量受損者和糖尿病者血脂水平，胰島素敏感性指數(shù)，胰島功能指數(shù)，并進(jìn)行分析；2)建立高脂誘導(dǎo)肥胖大鼠模型，利用RealtimePCR和免疫印記技術(shù)檢驗(yàn)肥胖大鼠胰島及其他組織是否存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激；通過(guò)原位灌注胰島分離的方法，對(duì)大鼠胰島的大小形態(tài)，胰島素分泌功能進(jìn)行研究；3)軟脂酸對(duì)胰島細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間孵育，觀(guān)察其凋亡增殖現(xiàn)象，探索內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在其中的作用和可能機(jī)制。 結(jié)果：1)1小時(shí)高血糖者構(gòu)成比在正常糖耐量組，糖耐量異

4、常組，糖尿病組中比例逐漸增高，糖耐量正常伴1小時(shí)高血糖者早期胰島素分泌功能較糖耐量正常組明顯下降，同時(shí)血脂伴有顯著升高，與糖耐量受損者接近；2)Gadd153/Chop，XBP-1等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記物在肥胖大鼠胰島細(xì)胞中表達(dá)明顯增高，但分子伴侶Grp78/Bip蛋白表達(dá)變化不大；肥胖大鼠分離出胰島直徑大于300μm的比例明顯高于對(duì)照組，但并未發(fā)現(xiàn)胰島單個(gè)細(xì)胞直徑有顯著增加；3)體外條件下，軟脂酸長(zhǎng)期作用后MIN6細(xì)胞凋亡增多，增殖減少，細(xì)

5、胞多停滯于G1/S和G2/M，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記分子Gadd153/Chop，XBP-1等表達(dá)升高，同時(shí)伴CyclinD2下調(diào)。 結(jié)論：1)1小時(shí)高血糖是由于早期胰島素釋放功能減低引起，與脂代謝異常相關(guān)，可能是一種尚未被重視的代謝異常，但1小時(shí)高血糖是否增病者血脂水平，胰島素敏感性指數(shù)，胰島功能指數(shù)，并進(jìn)行分析；2)建立高脂誘導(dǎo)肥胖大鼠模型，利用RealtimePCR和免疫印記技術(shù)檢驗(yàn)肥胖大鼠胰島及其他組織是否存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激；通過(guò)原