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文檔簡介
1、隨著人類基因組計劃的結(jié)束,蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系已經(jīng)成為生命科學的前沿方向。蛋白質(zhì)的甲基化、磷酸化、糖基化和泛素化受到科研工作者的廣泛關(guān)注。如何獲得高純度的此類蛋白是相關(guān)研究得以進行的關(guān)鍵。傳統(tǒng)的生物表達方法只能獲得天然氨基酸序列的蛋白質(zhì),而翻譯后修飾蛋白往往很難獲得。最近,Schultz發(fā)展的人工編碼非天然氨基酸技術(shù),可以將非天然氨基酸嵌入到目標蛋白中,從而獲得某些翻譯后修飾蛋白。但是該方法蛋白表達效率較低,且可嵌入的非天然氨基酸
2、數(shù)量有限。蛋白質(zhì)化學合成技術(shù)被認為是獲得翻譯后修飾蛋白強有力的手段。在蛋白質(zhì)片段連接中,Kent發(fā)展的自然化學連接反應(yīng)被成功應(yīng)用于許多重要蛋白的化學全合成中。自然化學連接反應(yīng)是通過C端硫酯肽和N端半胱氨酸肽之間化學選擇性成酰胺鍵而實現(xiàn)肽片段連接。但是,自然化學連接反應(yīng)中C端硫酯肽無法通過Fmoc固相合成方法得到。為此,Liu課題組發(fā)展了多肽酰肼法來實現(xiàn)Fmoc法中C端硫酯肽的合成。該方法具有操作簡單,連接效率高的優(yōu)點。本文作者以多肽酰肼
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