蛇孢假殼素類化合物的發(fā)酵優(yōu)化及制備方法研究.pdf

1、特殊環(huán)境來源的微生物具有獨特的適應(yīng)機(jī)制和代謝途徑，從而代謝產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎和活性多樣的次級代謝產(chǎn)物，成為先導(dǎo)化合物的重要來源。代謝產(chǎn)物豐富，活性突出的“天才菌株”受到科學(xué)界的廣泛關(guān)注，是極具潛力的藥物開發(fā)資源。海南文昌紅樹林木欖根泥來源的特境微生物Aspergillus ustus094102代謝產(chǎn)生的Ophiobolin O在前期藥理活性研究中發(fā)現(xiàn)可以逆轉(zhuǎn)耐阿霉素乳腺癌MCF-7細(xì)胞(MCF/ADR)對阿霉素的抗藥性，但由于Ophiobo

2、lin O產(chǎn)量較小，影響了對該化合物的進(jìn)一步研究。為解決藥源供應(yīng)問題，我們開展了蛇孢假殼素類化合物的發(fā)酵優(yōu)化和制備方法的研究工作。同時為尋找活性先導(dǎo)化合物，對該菌產(chǎn)生的蛇孢假殼素類化合物和南海海綿樣品中獲得的1株放線菌的次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行研究。本論文主要包括以下內(nèi)容:
　　1.研究了特境微生物Aspergillus ustus094102代謝產(chǎn)生的蛇孢假殼素類化合物的定性定量檢測、發(fā)酵優(yōu)化、萃取與制備方法。
　　2.采用薄層色

3、譜、正反相硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和高效液相等多種分離純化色譜方法從焦曲霉Aspergillus ustus094102分離出17個化合物，從放線菌71號中分離到3個化合物，共得到20個化合物，利用IR、UV、MS、NMR等波譜學(xué)方法和X-射線單晶衍射及化學(xué)反應(yīng)的方法確定了這些化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其中4個為新化合物。蛇孢假殼素類化合物14個(1～14)、3個補(bǔ)身烷型倍半萜類化合物(15～17)、2個環(huán)肽類化合物(18～19)和1個吲哚咔唑類

4、化合物(20)。
　　3.運用生物活性篩選模型，對菌株Aspergillus ustus094102和放線菌71號中分離出的化合物進(jìn)行活性測試。采用MTT法評價化合物的抗腫瘤活性。結(jié)果表明:化合物4～5和7～11對胰腺癌G3K細(xì)胞及乳腺癌MD-MAB-231、MCF-7和MCF/3K細(xì)胞抑制活性較強(qiáng)?；衔?8有強(qiáng)效的對人白血病細(xì)胞株K562的抑制活性。
　　4.對非曲霉和青霉來源的海洋真菌新天然產(chǎn)物進(jìn)行總結(jié)，總結(jié)了從20世

5、紀(jì)50年代頭孢菌素類抗生素發(fā)現(xiàn)開始至2014年8月共1123個化合物的來源、結(jié)構(gòu)和活性。
　　綜上所述，本文對產(chǎn)蛇孢假殼素類化合物的特境微生物Aspergillus ustus094102進(jìn)行發(fā)酵優(yōu)化，建立蛇孢假殼素類化合物定性和定量分析的方法及萃取分離制備方法，為此類化合物的成藥性研究中的藥源問題的解決提供了參考思路。對其衍生物進(jìn)行分離鑒定，分離得到14個蛇孢假殼素類化合物，其中4個為新化合物。此外還分離得到3個補(bǔ)身烷型倍半萜類