URI復(fù)合脂質(zhì)體的制備及質(zhì)量初步評(píng)價(jià).pdf

1、尿酸酶（Uricase，URI）是代謝生物體內(nèi)嘌呤的關(guān)鍵酶，可以催化氧化尿酸為尿囊素、二氧化碳和過(guò)氧化氫。血液中過(guò)量積累尿酸會(huì)導(dǎo)致痛風(fēng)、高尿酸血癥等高尿酸綜合癥狀。因?yàn)槿梭w缺乏尿酸酶，所以需要使用尿酸酶預(yù)防和治療與高尿酸相關(guān)的疾病。過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）可分解過(guò)氧化氫生成水和氧分子，清除過(guò)量的過(guò)氧化氫。將URI和CAT合用，既能清除體內(nèi)過(guò)多的過(guò)氧化氫，防止細(xì)胞凋亡，降低過(guò)氧化氫的細(xì)胞毒性；又能為分解尿酸提供氧氣，提高UR

2、I分解尿酸的能力。URI是蛋白質(zhì)類大分子物質(zhì)，存在易被酶降解、穩(wěn)定性差、活性半衰期短及體內(nèi)活性低等缺點(diǎn)。脂質(zhì)體（Liposomes, LP）常被用作藥物的包裹載體。脂質(zhì)體膜與生物膜具有相似性，它能夠提高藥物穩(wěn)定性，降低藥物毒副作用和免疫原性，延長(zhǎng)藥物生物半衰期，提高被包封藥物的生物利用度等優(yōu)點(diǎn)，且具有一定的緩釋和靶向效果。本研究構(gòu)建了復(fù)合尿酸酶/過(guò)氧化氫酶脂質(zhì)體（ Liposomes containing URI and CAT，UCL

3、P），考察了UCLP中URI的基本特性、穩(wěn)定性、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)。而關(guān)于CAT研究?jī)?nèi)容主要包括以下幾部分：
　　第一部分：采用逆向蒸發(fā)法制備UCLP，考察其形態(tài)，粒徑分布， Zeta電位，包封率。結(jié)果顯示：成功制備 UCLP，其形態(tài)呈類圓形， UCLP的粒徑為(759.30±28.12) nm，ζ電位為(-8.49±3.18) mV，電導(dǎo)率為(954.00±23.30)μs/cm。包封率為(56.87±3.81)％。

4、　　第二部分：對(duì)UCLP的基本特性進(jìn)行了初步考察，包括URI的最適pH、最適溫度、米氏常數(shù)（Km）、游離酶（URI和CAT）與脂質(zhì)體膜的作用及UCLP在280 nm處的熒光強(qiáng)度變化。UCLP中URI的最適溫度為40℃，最適pH為8.0，米氏常數(shù)為13.40μmol/L，游離酶可能與脂質(zhì)體膜有作用，URI和CAT經(jīng)脂質(zhì)體包裹后在280 nm處的熒光強(qiáng)度增加。
　　第三部分：考察了UCLP的熱穩(wěn)定性、貯存穩(wěn)定性、酸堿穩(wěn)定性、抗胰蛋白酶

5、水解能力和抗化學(xué)試劑的能力。結(jié)果顯示，在相同條件下， UCLP中URI的穩(wěn)定性明顯高于游離URI。UCLP抗化學(xué)試劑的能力也與游離URI不同。
　　第四部分：考察了 UCLP的在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)。大鼠靜脈注射UCLP，然后通過(guò)測(cè)定URI的活性來(lái)考察其藥代動(dòng)力學(xué)特性。UCLP與游離URI相比，UCLP明顯推遲了URI的達(dá)峰時(shí)間，增加了藥時(shí)曲線下面積，提高了生物利用度。
　　第五部分：構(gòu)建了小鼠高尿酸血癥動(dòng)物模型。UCLP降