電針足少陽(yáng)經(jīng)穴對(duì)NFATc1阻滯劑干預(yù)后雄性大鼠骨重塑平衡的調(diào)節(jié).pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:此次實(shí)驗(yàn)以FK506(信號(hào)阻滯劑)大鼠為研究對(duì)象,行足少陽(yáng)經(jīng)穴電針干預(yù)后進(jìn)一步觀察其骨組織切片,并檢測(cè)骨重塑相關(guān)轉(zhuǎn)錄基因的表達(dá),以探索電針對(duì)大鼠骨重塑過(guò)程相關(guān)信號(hào)分子、轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)通路及上、下游關(guān)系的影響。
  方法:由西南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的雄性SD大鼠,共計(jì)40只,鼠齡大小為:10個(gè)月,重量為:310±10g,全部用阿拉伯?dāng)?shù)字編號(hào)后查用Excel軟件生成的隨機(jī)數(shù)字表,分為:空白組10只和模型組30只,空白組不做任何處置

2、,針對(duì)模型組,再進(jìn)行隨機(jī)分配,分為三組,(1)模型對(duì)照組(FK506組)、(2)模型加預(yù)先電針組(預(yù)電針+FK506組)、(3)模型加電針組(電針+FK506組),進(jìn)行為期7天皮下注射FK506溶液(注射劑量:0.3ml/kg,F(xiàn)K506濃度:1mg/ml)。針對(duì)第(2)組,在進(jìn)行注射溶液之前,需要使用電針對(duì)足少陽(yáng)經(jīng)穴進(jìn)行7天的干預(yù)。經(jīng)FK506造模結(jié)束3天后,電針+FK506組及預(yù)電針+FK506組開始電針足少陽(yáng)經(jīng)穴(環(huán)跳、陽(yáng)陵泉、懸

3、鐘)的干預(yù),電針選疏密波,20Hz,1次/d,15分鐘/次,每個(gè)療程連續(xù)5次針刺干預(yù)后中斷2日,持續(xù)6個(gè)療程。處死后光鏡下觀察骨組織切片HE染色及骨小梁面積比,并使用RT-PCR技術(shù),對(duì)涉及骨重塑的關(guān)鍵基因,如OPG、RANKL、NFATc1及CBFa1mRNA表達(dá)的變化進(jìn)行檢測(cè)。
  結(jié)果:(1)空白組:骨小梁排列比較密集,主要呈塊狀和片狀,具有很好的連接性,呈網(wǎng)狀分布,髓腔組織結(jié)構(gòu)沒有明確的變化;FK506組:與空白組相比,骨

4、小梁排列明顯錯(cuò)亂,而且數(shù)量顯著減少,連續(xù)性低,距離明顯增大,寬度更細(xì)、更窄,而且髓腔有明顯變大;FK506+電針組,和FK506組比起來(lái),骨小梁的排列較為均勻,數(shù)量增加,寬度更粗,間距減小,而且連續(xù)性也稍微變好,而且髓腔有明顯的變小;FK506+預(yù)電針組:和FK506組比起來(lái),骨小梁的排列均勻,連續(xù)性增強(qiáng),數(shù)量增多,寬度變粗,間距減小,髓腔明顯變小。
  (2)骨小梁面積比:四組之間有很大的差異,具有高度的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00

5、6),但是FK506+預(yù)電針組和FK506+電針組雖然較空白組都有明顯的改善,但是兩者之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異(P>0.05)。
  (3)骨CBFa1mRNA表達(dá):FK506組的數(shù)值比空白組升高,預(yù)先電針+FK506組及FK506+電針組兩組,會(huì)出現(xiàn)降低現(xiàn)象,但是兩者之間的差異,都沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  (4)骨RANKLmRNA表達(dá):FK506組比空白組明顯增高,預(yù)先電針+FK506組及FK506+電針組要明顯

6、降低,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);但是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組之間,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  (5)骨OPGmRNA表達(dá):無(wú)論是FK506組同空白組相比,還是同兩個(gè)治療組進(jìn)行比較,還是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組之間進(jìn)行比較,都沒有明顯的差異,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  (6)骨NFATc1mRNA表達(dá):雖然FK506組比空白組要略高,但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;無(wú)論是模型三組之

7、間進(jìn)行比較,還是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組兩組之間進(jìn)行比較,均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
  結(jié)論:電針足少陽(yáng)經(jīng)穴能和調(diào)骨重塑偶聯(lián),繼而平衡成骨和破骨活動(dòng),其機(jī)制可能是通過(guò)兩個(gè)主控轉(zhuǎn)錄因子RANKL和NFATc1,調(diào)整全身骨代謝,產(chǎn)生和調(diào)骨重塑過(guò)程、再建正常偶聯(lián)的凈效應(yīng)。皮下注射高濃度FK506溶液,NFATc1mRNA表達(dá)受阻滯,則CBFa1mRNA過(guò)表達(dá),導(dǎo)致RANKLmRNA高表達(dá),可以成功誘導(dǎo)骨重塑失偶

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