七蟾扶正膠囊對(duì)SMMC-7721細(xì)胞裸鼠移植瘤的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)建立三批人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的裸鼠移植瘤模型，觀察七蟾扶正膠囊對(duì)裸鼠移植性SMMC-7721人肝癌細(xì)胞增殖的影響，并研究七蟾扶正膠囊的作用機(jī)理。
　　方法：人肝癌SMMC-7721細(xì)胞（4×106/只），接種至BABL/C裸鼠背部皮下，待裸鼠移植瘤體積長(zhǎng)至100-200mm3時(shí)分組給藥，隨機(jī)分為5組（10只/組），分為對(duì)照組，氟尿嘧啶(5-Fu)對(duì)照組(ip,25mg·kg-1)，七蟾高、中、低劑量（ig,3g·

2、kg-1、1.5g·kg-1、0.75g·kg-1），連續(xù)給藥20d。給藥期間測(cè)量移植瘤體積，計(jì)算相對(duì)腫瘤體積、腫瘤增值率。末次給藥后24h，處死取出移植瘤，稱(chēng)量瘤重，計(jì)算抑瘤率。以上實(shí)驗(yàn)重復(fù)三批。取腫瘤組織，固定包埋，做腫瘤組織病理切片，然后HE染色，觀察移植瘤組織病理形態(tài)。另取腫瘤組織研磨成細(xì)胞懸液，進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測(cè)，觀察裸鼠移植瘤組織細(xì)胞周期分布和裸鼠移植瘤細(xì)胞凋亡情況。另取腫瘤組織提取組織蛋白，通過(guò)蛋白質(zhì)印跡法（We

3、stern blot）檢測(cè)移植瘤組織中Bax、Bcl-2、Fas、Fasl蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：三批實(shí)驗(yàn)七蟾各給藥組腫瘤體積、相對(duì)腫瘤體積、裸鼠瘤重明顯小于對(duì)照組（P<0.01），其高、中、低劑量組給藥末腫瘤增值率分別為40.39％、51.98%、59.21%，腫瘤抑瘤率分別為57.18%、45.45%、32.98%。觀察移植瘤組織病理切片，各給藥組組織細(xì)胞體積變小，在組織中結(jié)節(jié)中可看到中度的壞死、出血等現(xiàn)象，細(xì)胞漿改變，部

4、分癌細(xì)胞水變性，核固縮、溶解及細(xì)胞崩解，病理性核分裂相減少。流式細(xì)胞儀檢測(cè)七蟾高、中、低劑量組移植瘤組織細(xì)胞處于G1期的比例均明顯高于對(duì)照組的比例（P<0.01）；七蟾高、中、低劑量移植瘤組織細(xì)胞總凋亡率為64.02、58.30、55.12，明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。Western blot分析顯示：七蟾各劑量組與對(duì)照組相比能夠明顯上調(diào)移植瘤組織中 Bax、Fas、Fasl蛋白表達(dá)，七蟾低劑量對(duì)照組相比能夠明顯下調(diào)移植瘤組織中 B