預(yù)缺血處理介導(dǎo)緊密連接蛋白Claudins對腎臟的保護作用.pdf

1、目的：
　　探討急性腎損傷過程中腎臟緊密連接蛋白Claudins的表達和分布變化，并證實預(yù)缺血處理對腎臟的保護作用可能與介導(dǎo)Claudins的表達和分布相關(guān)。
　　方法：
　　1、實驗分組：230只C57BL/6小鼠隨機分為對照組、假手術(shù)組、模型組、假預(yù)缺血干預(yù)組及預(yù)缺血干預(yù)組，除對照組外，其余各組再依據(jù)再灌注后時間點（0h，3h，6h，12h，24h，48h，3d，5d，7d）各分為9個亞組；
　　2、動物模型

2、：采用夾閉小鼠雙側(cè)腎蒂30 min的方法建立缺血再灌注腎損傷模型為模型組；假手術(shù)組僅分離暴露小鼠雙側(cè)腎蒂，不夾閉；假預(yù)缺血干預(yù)組僅游離雙側(cè)腎蒂但不夾閉，4d后按上述方法建立缺血再灌注腎損傷模型；預(yù)缺血干預(yù)組首先行雙側(cè)腎蒂夾閉15min后再灌注，4d后按上述方法建立缺血再灌注腎損傷模型。
　　3、實驗方法：全自動生化檢測儀檢測各組小鼠血清中的尿素氮及肌酐水平；HE染色觀察腎臟病理，腎小管間質(zhì)病理損傷評分法評估腎組織病理損傷程度。采用

3、RT-PCR及免疫組化方法檢測各組小鼠腎組織cldn-2、-10、-17的表達水平。
　　結(jié)果
　　1、腎功能變化及腎臟病理評分：血清尿素氮、肌酐水平及腎臟病理評分隨再灌注時間推移逐漸上升，至24h達峰值，隨后逐漸下降；預(yù)缺血干預(yù)組的血清尿素、肌酐水平及腎臟病理評分表達趨勢同模型組，但均顯著低于模型組各相同時點水平（P＜0.05）。
　　2、腎臟cldn-2的表達變化：模型組cldn-2的蛋白質(zhì)及mRNA表達水平在再灌

4、注后逐漸下調(diào)，6h至24h下降最快，至24h達最低值，約為基線值的2.5倍，隨后逐漸回升；預(yù)缺血干預(yù)組cldn-2亦逐漸下調(diào)，6h至24h下降趨勢較為平緩，至24小時達最低值，之后逐漸上調(diào)，但各時間點cldn-2的蛋白質(zhì)及mRNA表達水平顯著高于模型組同時間點。
　　3、cldn-10的表達變化：模型組cldn-10的蛋白質(zhì)及mRNA表達水平在再灌注后逐漸下調(diào)，至24h表達最低，之后逐漸上調(diào)。預(yù)缺血干預(yù)組cldn-10的蛋白質(zhì)及