SIRT3基因多態(tài)性與老年慢性心衰相關(guān)性的初步臨床研究.pdf

1、研究背景
　　隨著我國(guó)步入老齡化社會(huì)，心衰的發(fā)病率有逐漸上的升趨勢(shì)，尤其對(duì)于老年人心衰是嚴(yán)重威脅健康和影響生活質(zhì)量的心臟疾病。慢性心衰是一種不可逆轉(zhuǎn)的發(fā)展過(guò)程，有著復(fù)雜的調(diào)節(jié)機(jī)制。SIRT3是位于線粒體中的一種與長(zhǎng)壽相關(guān)的穩(wěn)定蛋白。SIRT3通過(guò)調(diào)節(jié)線粒體乙?；顒?dòng)來(lái)提高抗氧化防御和保護(hù)線粒體功能等。線粒體功能障礙是許多心血管疾病的核心作用，如肥厚型和擴(kuò)張型心肌病，心臟衰竭，早期動(dòng)脈粥樣硬化內(nèi)皮功能障礙和肺動(dòng)脈高壓SIRT3蛋白可

2、以通過(guò)影響氧化磷酸化、三羧酸循環(huán)和β-氧化調(diào)控細(xì)胞代謝，提示其與代謝綜合癥密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)SIRT3基因單核苷酸多態(tài)性能增加個(gè)體代謝綜合征的危險(xiǎn)性。而上述過(guò)程也與心力衰竭緊密聯(lián)系。因此本研究重點(diǎn)探討編碼SIRT3基因單核苷酸多態(tài)性對(duì)老年慢性心衰的影響。
　　研究目的
　　(1)研究SIRT3基因多態(tài)性在老年慢性心衰患者中的表達(dá);
　　(2)研究SIRT3基因多態(tài)性與老年慢性心衰各組分的關(guān)系;
　　(3)探討S

3、IRT3基因多態(tài)性與老年慢性心衰的關(guān)系及可能機(jī)制。
　　研究方法
　　1.研究對(duì)象的選擇及分組
　　根據(jù)2014年CSC發(fā)布的中國(guó)心力衰竭診斷和治療指南，并且排除肺栓塞，急性心肌梗死，多器官衰竭綜合征等疾病，隨機(jī)抽樣的方法連續(xù)選取2015年7月-2016年7月在山東大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)科住院患者共105例，其中男53例，女52例，平均（67.15±6.35）歲。同時(shí)于2015年7月-2016年7月在山東大學(xué)第二醫(yī)院健康管理

4、中心查體的健康體檢人員中隨機(jī)抽取樣本，共有98例健康志愿者，其中男51例，女47例，平均（67.36±5.93）歲，上述志愿者經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查及各種輔助檢查后，排除各種器質(zhì)性疾病。
　　2.心臟彩超及生化指標(biāo)的檢測(cè)
　　(1)入院后24h內(nèi)完成，采用GE Vivid7型彩色多普勒超聲顯像儀進(jìn)行檢查和測(cè)量，由專(zhuān)業(yè)醫(yī)師操作并記錄左室射血分?jǐn)?shù)。
　　(2)于清晨七點(diǎn)抽取肘靜脈空腹血，測(cè)定BNP，血糖(BG)，甘油三酯(TG)，總

5、膽固醇(TC)，極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL)。
　　3.實(shí)驗(yàn)方法
　　(1)收集老年慢性心衰患者與志愿者的空腹外周靜脈血標(biāo)本，經(jīng)超速離心后血清、紅細(xì)胞、白細(xì)胞分為三層，提取出白細(xì)胞。
　　(2)將白細(xì)胞至于無(wú)菌EP管中，提取DNA后于-80℃環(huán)境中凍存。
　　(3)進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)并檢測(cè)SIRT3基因rs11246020位點(diǎn)的多態(tài)性。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　應(yīng)用SPS

6、S22.0分析軟件分析所獲取的數(shù)據(jù)資料，其中均值士標(biāo)準(zhǔn)差（-x±s）表示計(jì)量資料，樣本組間比較用Student't檢驗(yàn);然后采用擬合優(yōu)度檢驗(yàn)，計(jì)算各組等位基因頻率，并進(jìn)行Hardy-Weinberg基因遺傳檢驗(yàn)，判斷樣本的代表性;最后對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Logistic回歸分析，探討rs11246020位點(diǎn)多態(tài)性和慢性心衰的關(guān)系。P＜0.05，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)果
　　1.rs11246020位點(diǎn)的AA、AG、GG基因

7、型及其等位基因在正常對(duì)照組和心衰組的分布符合Hardy-Weinberg遺傳規(guī)律，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.老年慢性心衰組與對(duì)照組相比，BNP、BS、TG、TC和VLDL升高（P均＜0.05），LVFE和HDL降低(P＜0.05）。
　　3.老年慢性心衰組內(nèi)攜帶AG+AA等位基因的個(gè)體與攜帶GG等位基因個(gè)體相比具有較高的血糖水平(P＜0.05)。攜帶AG+AA等位基因的個(gè)體與攜帶GG等位基因個(gè)體相比具

8、有較高的膽固醇水平(P＜0.05)。
　　4.老年慢性心衰組內(nèi)攜帶GG等位基因的個(gè)體與攜帶AG+AA等位基因個(gè)體相比具有較低BNP水平，攜帶GG等位基因的個(gè)體與攜帶AG+AA等位基因個(gè)體相比具有較高的射血分?jǐn)?shù)(P均＜0.05）。
　　5.對(duì)以上數(shù)據(jù)進(jìn)行Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)基因型AA+AG(P＜0.001)、血糖(P＜0.001)、甘油三酯（P＜0.05）、膽固醇(P＜0.01)能夠進(jìn)入回歸方程，表明心衰指標(biāo)BNP與S