苦參止痢膠囊對犬細(xì)小病毒病的治療作用.pdf

1、犬細(xì)小病毒病因其高傳染性和高死亡率，成為危害犬最大的疫病之一。由于用于輔助治療的各種化學(xué)藥物會帶來耐藥性等一系列問題，使得研發(fā)新型高效、無毒無副作用的抗犬細(xì)小病毒病中藥制劑成為新課題?？鄥⒅沽∧z囊是根據(jù)中獸醫(yī)理論和衛(wèi)氣營血辨證施治的原則，選用苦參、白芍、木香等組成的中藥復(fù)方膠囊制劑，具有清熱燥濕，涼血止痢的功效。本文通過細(xì)胞試驗(yàn)、動物試驗(yàn)和臨床用藥來探討苦參止痢膠囊對犬細(xì)小病毒病的治療作用。
　　試驗(yàn)一高效液相色譜法測定苦參止痢膠

2、囊有效成分的含量
　　采用反向高效液相色譜法測定苦參止痢膠囊中苦參堿、氧化苦參堿、芍藥苷、去氫木香內(nèi)酯和木香烴內(nèi)酯的含量。采用Phenemonex C18(250 mm×4.6 mm，5μm)色譜柱，苦參堿和氧化苦參堿用10mmol/L的醋酸胺水溶液（用氨水調(diào)節(jié)pH8）-甲醇梯度洗脫的流動相，紫外檢測波長為210nm，流速:1mL/min;芍藥苷用乙腈-0.1％磷酸溶液(14∶86)的流動相，紫外檢測波長為230nm，流速:1mL

3、/min;去氫木香內(nèi)酯和木香烴內(nèi)酯用甲醇-水(65∶35)的流動相，紫外檢測波長為225nm，流速:0.65mL/min。結(jié)果苦參止痢膠囊中苦參堿為2.2mg/g、氧化苦參堿為1.05mg/g、芍藥苷為9.1m g/g和去氫木香內(nèi)酯為13.5mg/g，木香烴內(nèi)酯由于含量過低未測出。
　　試驗(yàn)二苦參止痢膠囊在細(xì)胞上對犬細(xì)小病毒的作用研究
　　為了觀察苦參止痢膠囊體外對犬細(xì)小病毒的作用，以FK81細(xì)胞為載體，通過間接免疫熒光試驗(yàn)

4、(IFA)，用熒光素標(biāo)記進(jìn)入細(xì)胞的犬細(xì)小病毒，在熒光倒置顯微鏡下觀察，用ImageJ軟件分析熒光。結(jié)果顯示先加中藥再感染病毒組和中藥與病毒作用后感染組都能顯著減少FK81細(xì)胞中犬細(xì)小病毒的表達(dá)量，先加中藥再感染病毒組平均減少量為36％，中藥與病毒作用后感染組平均減少量為46％;先感染病毒再加中藥組FK81細(xì)胞中病毒表達(dá)量與陽性組無顯著差異。表明苦參止痢膠囊溶液在細(xì)胞上能有效阻止犬細(xì)小病毒的吸附和侵入，對于在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的犬細(xì)小病毒無明顯抑

5、制作用。
　　試驗(yàn)三中西藥治療犬細(xì)小病毒病的臨床試驗(yàn)
　　為了觀察苦參止痢膠囊對犬細(xì)小病毒病的治療作用，用水平感染的7只病犬作為動物模型，分為中藥組、西藥組和陽性組，分別為3只、3只和1只，1只健康犬為空白，用苦參止痢膠囊和西藥治療，通過臨床癥狀、病理解剖和組織病理學(xué)切片光鏡及電鏡觀察。結(jié)果顯示:苦參止痢膠囊和西藥都能控制犬細(xì)小病毒病，其中苦參止痢膠囊組沒有出現(xiàn)血痢的癥狀，組織病理學(xué)切片觀察腸道組織也沒有明顯的出血，并且維持

6、了腸絨毛結(jié)構(gòu)的完整性，表明苦參止痢膠囊能抑制犬細(xì)小病毒引起的腸黏膜損傷和出血性病變，從而對犬細(xì)小病毒病達(dá)到治愈作用。
　　試驗(yàn)四苦參止痢膠囊治療犬細(xì)小病毒病的擴(kuò)大臨床試驗(yàn)
　　為了進(jìn)一步探討苦參止痢膠囊防治犬細(xì)小病毒病的效果。方法:利用動物醫(yī)院門診收治的犬細(xì)小病毒病病例，采用純西藥治療與中西藥聯(lián)合治療的對比試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)兩種藥的治愈率、治愈療程等情況。結(jié)果:用純西藥治療的32只犬細(xì)小病毒病病例的治愈率為75％;應(yīng)用苦參止痢膠囊的