姜黃素對(duì)氧化性低密度脂蛋白誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力的影響.pdf

1、目的：研究姜黃素(Curcumin)對(duì)氧化性低密度脂蛋白（ oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力的影響，并探討其可能的機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)，細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)24h，HUVECs融合度在80％左右時(shí)加入ox-LDL建立氧化應(yīng)激損害模型，觀察curcumin

2、對(duì)細(xì)胞遷移能力的影響。不同濃度的 ox-LDL(0,10,20,40,80,160mg/L)處理HUVECs24h后，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。細(xì)胞分為4組：①正常對(duì)照組：細(xì)胞在正常條件下培養(yǎng)；②Curcumin處理組：（ Curcumin,25μmol/L,24h）；③ox-LDL處理組：（ox-LDL,20mg/L,24h）；④Curcumin預(yù)處理+ox-LDL處理組：Curcumin預(yù)處理（25μmol/L,2h）后，加入ox-

3、LDL(20 mg/L,24h)。酶標(biāo)儀比色法檢測(cè)總NO水平；激光共聚焦顯微鏡檢測(cè) ROS含量；Western blot測(cè)定細(xì)胞內(nèi) eNOS，磷酸化eNOS[p?eNOS(Ser1177)]，Akt，磷酸化 Akt[p?Akt(Ser473)]，ICAM-1表達(dá)水平；細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)（Transwell method）觀察HUVECs遷移數(shù)目的變化。
　　結(jié)果：當(dāng)ox-LDL濃度升高到40 mg/L時(shí)，與正常對(duì)照組比較，內(nèi)皮細(xì)胞存活率

4、下降[(9.59±2.10)% vs(5.05±0.79)%,P<0.05]，隨著ox-LDL濃度的升高，HUVECs凋亡率增加（P<0.01）。與正常對(duì)照組比較，ox-LDL處理組顯著降低細(xì)胞內(nèi)NO含量、細(xì)胞遷移能力(0.21±0.057vs1.00±0.054,P<0.01；16.75±2.58vs40.69±6.46,P<0.001）；降低Akt(Ser473)、eNOS(Ser1177)蛋白的磷酸化水平(0.28±0.04 vs

5、1.00±0.09,P<0.05；0.37±0.07 vs1.00±0.06,P<0.001)；增加ROS含量、ICAM-1蛋白表達(dá)(3.24±0.18vs1.00±0.06,P<0.01；2.58±0.28 vs1.00±0.18，P<0.01)。與ox?LDL處理組比較，Curcumin預(yù)處理+ox-LDL處理組可以降低細(xì)胞內(nèi)ROS含量，減少I(mǎi)CAM-1蛋白表達(dá)(1.47±0.19 vs3.24±0.18,P<0.001；1.36±

6、0.28 vs2.58±0.28,P<0.05)；提高Akt(Ser473)和eNOS(Ser1177)磷酸化水平(0.74±0.05 vs0.28±0.04, P<0.05；0.88±0.17vs0.37±0.07,P<0.01)；并且提高細(xì)胞內(nèi)的NO水平，增加細(xì)胞遷移數(shù)目，內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力增加(0.79±0.05vs0.21±0.06, P<0.05；27.72±5.36 vs16.75±2.58, P<0.05)。
　　結(jié)論