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1、目的:建立糖尿病下肢缺血大鼠動(dòng)物模型(STZ缺血大鼠模型),導(dǎo)入質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的小凹蛋白(Caveolin-1),觀察 Caveolin-1對(duì)糖尿病大鼠缺血組織中NO的影響及機(jī)制。
方法:應(yīng)用STZ法構(gòu)建糖尿病大鼠,將80只糖尿病大鼠隨機(jī)分為4組(每組20只):A組為假手術(shù)對(duì)照組;B組為缺血組(單純結(jié)扎股動(dòng)脈);C組為缺血空轉(zhuǎn)染組(結(jié)扎股動(dòng)脈并轉(zhuǎn)染不含Caveolin-1的質(zhì)粒);D組為缺血轉(zhuǎn)染組(結(jié)扎股動(dòng)脈并轉(zhuǎn)染Caveolin-
2、1),監(jiān)測(cè)各組血糖,并于轉(zhuǎn)染后14天取缺血部位肌肉組織,分別應(yīng)用Elisa法檢測(cè)各組組織中NO水平,免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)組織中Caveolin-1、eNOS的含量,應(yīng)用Image-Pro Plus(IPP)6.0圖像分析系統(tǒng)對(duì)缺血組織中Caveolin-1、eNOS進(jìn)行半定量分析,HE染色觀察組織形態(tài)及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況。
結(jié)果:各組血糖均高于16.8mmol/L,Elisa檢測(cè)缺血組織中NO,見(jiàn)各組均有NO的表達(dá),缺血組中NO
3、的表達(dá)明顯低于假手術(shù)組(P<0.05),缺血轉(zhuǎn)染組組織中的NO水平明顯高于其他各組(P<0.05)。免疫組化半定量檢測(cè)顯示:缺血組Caveolin-1蛋白的表達(dá)較假手術(shù)組明顯增多(P<0.05),eNOS的蛋白水平變化不大(P>0.05),NO含量明顯減少(P<0.05),缺血轉(zhuǎn)染組中的Caveolin-1、eNOS及NO的含量比其他三組明顯增多(P<0.05)。HE染色見(jiàn)假手術(shù)對(duì)照組缺血組織細(xì)胞形態(tài)大致正常,無(wú)充血、水腫,缺血組組及空
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