益腎湯對糖尿病大鼠腎組織TGF-β1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：用鏈脲菌素(Streptozocin，STZ)誘發(fā)、建立糖尿病(Diabetes，DM)大鼠模型；觀察中藥復(fù)方“益腎湯”對實驗性DM大鼠腎臟的保護(hù)作用及對轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1)表達(dá)的影響，并以血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑(Angiotensinreceptorblocker，ARB)“纈紗坦”作為對照，探討“益腎湯”保護(hù)糖尿病腎病(Diabeticnephropathy

2、，DN)的作用機(jī)制。 方法：成年雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分成4組，分別為正常對照組(CON)、DM未治療組(DMN)、DM纈紗坦治療組(ARB)、DM益腎湯治療組(YS)。各DM大鼠于空腹?fàn)顟B(tài)一次性腹腔內(nèi)注射2％STZ誘發(fā)DM模型；72小時后測定血糖，如血糖＞16.7mmol/L，并穩(wěn)定2-3天即算建模成功。YS組給予相當(dāng)于生藥6.5g/公斤體重/天的濃縮藥液灌胃；ARB組給予纈紗坦，按20mg/公斤體重/天灌胃；CON及DMN

3、組按等量飲用水灌胃。各大鼠每周測量體重，根據(jù)體重調(diào)整喂藥量；10周后，測定每只大鼠體重；留取24小時尿液，記尿量，用于測定24小時尿總蛋白、白蛋白含量；以10％水合氯醛麻醉處死大鼠。留取血液標(biāo)本，部分血液離心取血清，測定血糖、肌酐、尿素氮、胰島素，留取抗凝全血用以測定糖化血紅蛋白(Hemoglobin，HbA1c)等指標(biāo)，并采用ELISA法檢測各標(biāo)本血TGF-β1濃度；取左腎經(jīng)生理鹽水洗滌并擦干后稱重；取右腎縱形切開一半以10％中性福爾

4、馬林固定，石蠟包埋，制作切片進(jìn)行免疫組化檢測TGF-β1的表達(dá)及分布，并利用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析；另一半右腎取皮質(zhì)標(biāo)本進(jìn)行電鏡觀察、拍照，應(yīng)用圖像分析儀對所拍照片的腎小球毛細(xì)血管基底膜厚度(Glomerularbasementmembrane，GBM)進(jìn)行分析、測量。 結(jié)果：大鼠成功誘發(fā)DM。(1)、體重：DMN組顯著低于CON、YS、ARB三組(p＜0.05)；而YS、ARB組與CON組比較無顯著差異。(2)、腎重：ARB

5、、YS組較CON、DMN組顯著升高；而腎重/體重則DM三組均顯著大于CON組，YS、ARB兩組高于CON組(p＜0.05)。(3)、血糖：DM三組均顯著高于CON組，YS、ARB組顯著低于DMN組(p＜0.05)。(4)、HbA1e：DM三組顯著高于CON組，YS，ARB組顯著低于DMN組(p＜0.05)。(5)、空腹胰島素：DMN組顯著低于其它三組(p＜0.05)，YS、ARB組與CON組無顯著性差異。(6)、24h尿量：DM三組均顯

6、著高于CON組，YS、ARB組顯著低于DMN組(p＜0.05)。(7)、24h尿總蛋白：DMN組顯著高于其它三組(p＜0.05)，YS、ARB組與CON組無顯著性差異。(8)、24h尿白蛋白：DMN組顯著高于其它三組，YS組較CON組顯著升高(p＜0.05)，而ARB組與YS組、CON組比較無顯著差異。(9)、血肌酐：各組間無顯著性差異。(10)、血尿素氮：DMN組顯著高于其余三組(p＜0.05)，CON、YS、ARB三組間無顯著性差異

7、。(11)、GBM：DM三組較CON組顯著性增厚，YS、ARB組顯著低于DMN組(p＜0.05)，ARB組與YS組比較無顯著差異。(12)、血TGF-β1濃度：各組間無顯著性差異(p＞0.05)(13)、腎臟TGF-β1表達(dá)量：DMN組顯著高于其余三組(p＜0.05)，YS、ARB兩組高于CON組(p＜0.05)，YS、ARB組間差異無顯著性。相關(guān)分析：血TGF-β1濃度與24h尿總蛋白、24h尿自蛋白濃度、GBM無相關(guān)。腎臟TGF-β