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1、目的:用鏈脲佐菌素(STZ)誘發(fā)、建立糖尿病大鼠模型;觀(guān)察中藥復(fù)方“益腎湯”對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用及對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達(dá)的影響,并以血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)“纈紗坦”作為對(duì)照,探討“益腎湯”防治糖尿病腎?。―N)的作用機(jī)制。 方法:成年雄性SD大鼠47只,隨機(jī)分成正常對(duì)照組(CON)和糖尿病建模組。各建模組大鼠于空腹?fàn)顟B(tài)一次性腹腔內(nèi)注射2%STZ誘發(fā)糖尿病模型;72小時(shí)后測(cè)定血糖,如血糖>1
2、6.7mmol/L,并穩(wěn)定2-3天即算建模成功。建模成功的糖尿病大鼠再隨機(jī)分成糖尿病未治療組(DMN)、糖尿病纈紗坦治療組(ARB)、糖尿病益腎湯治療組(YS)。ARB組給予纈紗坦,按20mg/公斤體重/天灌胃;YS組給予相當(dāng)于生藥6.5g/公斤體重/天的濃縮藥液灌胃;CON及DMN組按相當(dāng)劑量飲用水灌胃。各大鼠每周測(cè)量體重,根據(jù)體重調(diào)整喂藥量;9周后,測(cè)定每只大鼠體重;留取24小時(shí)尿液,記尿量,測(cè)定24小時(shí)尿總蛋白、白蛋白、肌酐、MC
3、P-1含量;以10%水合氯醛麻醉處死大鼠,心臟取血測(cè)定血糖、肌酐、尿素氮、MCP-1等指標(biāo);取左腎經(jīng)生理鹽水洗滌并擦干后稱(chēng)重;取右腎縱形切開(kāi)一半以10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,制作切片進(jìn)行免疫組化檢測(cè)MCP-1的表達(dá),并利用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。 結(jié)果:大鼠成功誘發(fā)糖尿病。體重:CON組顯著高于DMN、ARB、YS三組;而YS組顯著高于ARB與DMN組,ARB組與DMN組間無(wú)顯著差異。腎重量:YS組顯著大于DMN、ARB
4、組;而腎臟相對(duì)重量則糖尿病各組均顯著大于CON組,YS顯著低于DMN組,DMN與ARB組間無(wú)顯著差異。血糖:糖尿病各組均顯著高于CON組,ARB、YS二組顯著低于DMN組;YS與ARB組間無(wú)顯著差異。血肌酐:DMN顯著高于CON、YS、ARB三組;YS、ARB與CON組間無(wú)顯著差異。血尿素氮:所有糖尿病組均顯著高于CON組;YS、ARB組顯著低于DMN組;YS與ARB組間無(wú)顯著差異。血MCP-1:YS顯著低于CON組;DMN、ARB與C
5、ON組間無(wú)顯著差異。24h尿量:所有糖尿病組均顯著高于CON組,ARB、YS顯著低于DMN組;YS與ARB組間無(wú)顯著差異。24h尿總蛋白含量(24h尿總蛋白/尿肌酐):所有糖尿病組均顯著高于CON組,YS、ARB二組顯著低于DMN組,YS組顯著低于ARB組。24h尿白蛋白含量(24h尿總蛋白/尿肌酐):所有糖尿病組均顯著高于CON組,YS、ARB二組顯著低于DMN組,YS組顯著低于ARB組。24h尿MCP-1(尿MCP-1/尿肌酐):D
6、MN、YS組顯著高于CON組,ARB與CON組間無(wú)顯著差異:YS、ARB組顯著低于DMN組;YS與ARB組間無(wú)顯著差異。腎臟MCP-1表達(dá):所有糖尿病組均顯著高于CON組;YS、ARB組顯著低于DMN組;YS與ARB組間無(wú)顯著差異。相關(guān)分析:腎臟MCP-1表達(dá)量與血糖、24h尿總蛋白、24h尿白蛋白、24h尿MCP-1呈顯著正相關(guān);24h尿MCP-1與血糖、24h尿總蛋白、24h尿白蛋白呈顯著正相關(guān)。 結(jié)論:STZ誘導(dǎo)的糖尿病大
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