蛋氨酸負(fù)荷對去卵巢大鼠主動脈病變的影響及葉酸、NAC的干預(yù)作用.pdf

1、目的:探討蛋氨酸負(fù)荷對去卵巢大鼠主動脈病變的影響及雌激素、葉酸、N-乙酰半胱氨酸的干預(yù)作用及其機(jī)制,為防治動脈粥樣硬化提供新思路。
　　 方法:將48只健康4月齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為6組,每組八只:(1)假手術(shù)組(SHAM組)、(2)去卵巢組(OVX組)、(3)蛋氨酸組(去卵巢+蛋氨酸1 g.kg-1.d-1,MET組)、(4)雌激素治療組(去卵巢+蛋氨酸+17β-雌二醇0.1mg.kg-1.d-1,ERT組)、(5)葉酸治療組

2、(去卵巢+蛋氨酸+葉酸20 mg.kg-1.d-1,FA組)、(6)N-乙酰半胱氨酸治療組(去卵巢+蛋氨酸+N-乙酰半胱氨酸100 mg.kg-1.d-1,NAC組)。除SHAM組,其余各組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù),SHAM組和OVX組灌服蒸餾水,其余各組給予蛋氨酸灌胃,術(shù)后一周開始藥物干預(yù)。用藥九周后,處死所有大鼠,測定血清總同型半胱氨酸(tHcy)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇

3、(HDL-C)和總抗氧化能力(TAC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—Px)活力、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)濃度；取主動脈制備HE病理切片,光鏡觀察主動脈形態(tài)學(xué)改變；免疫組織化學(xué)法觀察主動脈組織核因子-κB(NF-κB)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)和內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)的表達(dá)。
　　 結(jié)果
　　 1.與SHAM組相比,OVX、MET組大鼠血清tHcy濃度明顯升高

4、(p<0.01)；與OVX組比,MET組大鼠血清tHcy濃度進(jìn)一步升高(p<0.01)；與MET組相比,ERT、FA、NAC組大鼠血清tHcy濃度均明顯降低(p<0.01),但仍高于SHAM組水平。
　　 2.與SHAM組相比,OVX、MET組血清TC、LDL-C濃度明顯升高(p<0.01),HDL-C濃度降低(p<0.05,p<0.01);與OVX組比,MET組血清HDL-C濃度進(jìn)一步降低(p<0.05)；與MET組相比,ER

5、T、FA、NAC組血清TC、LDL-C濃度均明顯降低(p<0.01),HDL-C濃度均明顯升高(p<0.01),接近SHAM組水平(p>0.05)；各組TG均無明顯差異(p>0.05)；大鼠血清tHcy濃度與血清TC、LDL-C呈正相關(guān)(r=0.295,p=0.023；r=0.367,p=0.006)。
　　 3.與SHAM組相比,OVX、MET組血清TAC、GSH-Px活性明顯降低(p<0.01),MDA濃度明顯升高(p<0.

6、01)；與OVX組相比,MET組血清中TAC、GSH-Px活性進(jìn)一步下降(p<0.05,P<0.01),而MDA濃度進(jìn)一步明顯升高(p<0.01)；與MET組相比,ERT、FA、NAC組血清TAC、GSH—Px活性明顯升高,而MDA濃度明顯下降(p<0.01),且FA、NAC組血清MDA濃度及NAC組GSH-Px活性均接近SHAM組水平(p>0.05)；大鼠血清tHcy濃度與血清TAC、GSH—Px呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.615,p=0

7、.000；r=-0.526,p=0.000),與MDA呈顯著正相關(guān)(r=0.724,P=0.000)。
　　 4.與SHAM組相比,OVX、MET組血清NO濃度明顯降低(p<0.01)；與OVX組相比,MET組血清NO濃度進(jìn)一步降低(p<0.05);與MET組相比,ERT、FA、NAC組血清NO濃度均明顯升高(p<0.01),且ERT、NAC組血清NO濃度接近SHAM組水平(p>0.05)；大鼠血清tHcy濃度與血清NO呈負(fù)相關(guān)

8、(r=-0.424,p=0.002)。
　　 5.與SHAM組相比,OVX、MET組大鼠主動脈出現(xiàn)泡沫細(xì)胞；與OVX組相比,MET組病變較嚴(yán)重,出現(xiàn)鈣化壞死區(qū)；與MET組相比,ERT、FA、NAC組血管病理改變均有不同程度減輕。
　　 6.與SHAM組相比,OVX、MET組大鼠主動脈組織NF-κB、MCP-1的表達(dá)明顯升高(p<0.01)；與OVX組相比,MET組NF-κB、MCP-1的表達(dá)進(jìn)一步升高(p<0.01)；與

9、MET組相比,ERT、FA、NAC組NF-κB、MCP-1表達(dá)明顯降低(p<0.01),且FA組NF-κB的表達(dá)接近SHAM組水平(p>0.05)。
　　 7.與SHAM組相比,OVX、MET組eNOS的表達(dá)明顯減弱(p<0.01)；與OVX組相比,MET組eNOS的表達(dá)進(jìn)一步減弱(p<0.05)；與MET組相比,ERT、FA、NAC組eNOS的表達(dá)明顯提高(p<0.01),且ERT、NAC組eNOS表達(dá)接近SHAM組水平;各組