人參皂苷Rb1對慢性缺血損傷大鼠腦組織中自噬表達的影響.pdf

1、目的:探討人參皂苷Rb1對自噬調節(jié)的作用，以期能尋找一種減輕腦缺血缺氧后腦組織損傷的中藥，進而減輕腦缺血缺氧對機體帶來的影響。
　　方法:將30只SD大鼠隨機分成6組，每組5只，分別為高劑量組、中劑量組、低劑量組、空白對照組、假手術組、未做處理組，通過永久性結扎雙側頸總動脈模擬腦缺血缺氧模型，分別按照10mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg的濃度在造模后1-28天對高劑量組、中劑量組、低劑量組進行腹腔注射，每天一次，并對假手

2、術組和空白對照組每天給予超純水0.5ml，未做處理組不進行腹腔注射作為對照。同時1、分別在造模前、造模45天后、造模90天后對各組大鼠進行為期10天的水迷宮實驗(具體包括定位航行實驗、工作記憶實驗)以通過觀察各組大鼠尋找平臺的功能來評估大鼠的學習記憶能力進而評價其認知功能。2、在最后一次水迷宮實驗結束后對大鼠斷頭取腦，收集其額葉及海馬組織，①Western blot檢測大鼠腦組織里Caspase-3、LC3B的含量，從而了解大鼠腦組織的

3、自噬水平。②將腦組織HE染色后在光學顯微鏡下觀察(1)腦:有沒有變性、壞死的皮質神經元，有沒有增生的膠質細胞，髓質有沒有出現(xiàn)水腫。(2)海馬:海馬各區(qū)域的椎體細胞有沒有變性及壞死等改變。同時對腦組織出現(xiàn)的各種以上改變進行程度輕重的評分。
　　結果:①與正常對照組、假手術組初次水迷宮后即獲得學習記憶能力，在第45天及90天后尋找平臺時間明顯縮短相比，模型組大鼠出現(xiàn)明顯認知功能障礙，具體表現(xiàn)為不管是工作記憶還是定位航行，模型組大鼠尋找

4、平臺的持續(xù)時間及潛伏期均延長(P＜0.05)，上臺前搜索距離明顯延長(P＜0.001)，這一表現(xiàn)在造模90天后表現(xiàn)更顯著。而人參皂苷Rb1可降低腦缺血缺氧大鼠尋找平臺的持續(xù)時間及潛伏期(P＜0.05)，同時明顯縮短模型大鼠上臺前的搜索距離(P＜0.001)，濃度越高效果越明顯。②所有腦缺血缺氧模型組的Caspase-3含量增高(P＜0.05)，LC3B含量降低(P＜0.05)，人參皂苷Rb1作用于模型鼠后可抑制Caspase-3的表達同

5、時促進LC3B的表達，且濃度越高效果越明顯。③HE染色后觀察模型組大鼠腦組織后可見:腦組織結構與未做處理組相比，大多數(shù)區(qū)域皮層結構消失，神經元壞死，局部組織因高度疏松而表現(xiàn)為網狀，可以看到血管及膠質細胞增殖;1區(qū)及2區(qū)海馬結構不清楚，大多數(shù)錐體細胞壞死、消失，殘留的個別壞死細胞結構不明;3區(qū)大多錐體細胞形狀不規(guī)則、核固縮、體積變性;病灶改變程度評分顯示模型組大鼠腦組織出現(xiàn)極重度改變;高劑量組、中劑量組腦組織為輕度改變，低劑量組腦組織為中