地爾硫卓對大鼠心肌挫傷后心功能障礙的保護效應與機制研究.pdf

1、隨著道路交通的發(fā)展，交通事故已日益成為威脅人類生命安全的世界性公害，全世界的交通事故平均每年造成120萬人死亡，中國一年內(nèi)因車禍喪生的人數(shù)已超過十萬，成為交通事故多發(fā)國家。在交通事故中，單純胸部創(chuàng)傷與復合傷中的胸部創(chuàng)傷總的發(fā)生率超過1/3，是臨床僅次于顱腦損傷的第二位外傷致死因素。交通事故中對胸部的高速撞擊常造成心臟損傷，鈍性胸部創(chuàng)傷（Blunt chest trauma，BCT）所致的心臟損傷臨床發(fā)生率約8-76％，其中以心肌挫傷（M

2、yocardiAlcontusion，MC）最常見。在臨床上，MC 因其發(fā)病隱秘，且缺乏診斷的“金標準”，特別是在患者合并其他系統(tǒng)的嚴重傷情時，往往容易忽略心臟損傷的嚴重性。目前對心臟撞擊傷的研究主要針對胸部撞擊后心臟損傷的診斷及嚴重損傷致心臟大血管破裂急救方面的研究，而對撞擊后中至重度的心肌挫傷及其繼發(fā)的心臟功能障礙方面的研究較少。動物實驗研究發(fā)現(xiàn)中至重度MC后可出現(xiàn)心功能障礙，傷后2-4h 尤為明顯，至傷后24h 左心室收縮壓已可恢

3、復至傷前水平，舒張功能的恢復時間還要延長，同時研究還發(fā)現(xiàn)，MC后受損的心肌細胞出現(xiàn)鈣超載現(xiàn)象，鈣超載尤以傷后4～8h為明顯，傷后24h 胞內(nèi)游離鈣離子（[Ca2+]I）濃度仍高于傷前。MC后心臟功能障礙與鈣超載的發(fā)生機制目前尚不明了。
　　 本實驗在建立大鼠胸部撞擊傷致心臟中至重度損傷動物模型的基礎上，應用鈣通道阻滯劑地爾硫卓進行干預，觀察其在傷后不同時相點減輕細胞鈣超載、保護心功能方面的作用，并進一步從細胞骨架結(jié)構(gòu)的破壞方面探

4、討MC后心功能障礙的發(fā)生機制，為臨床診斷和治療此類患者提供理論和實驗依據(jù)。
　　 主要方法：因為MC患者傷情多較重，不適宜行臨床研究，本實驗應用自制的BIM-Ⅲ小型多功能生物撞擊機建立大鼠胸部撞擊致中至重度心肌挫傷動物模型，應用大體解剖AIS 評分系統(tǒng)+左心室置管心功能檢測綜合評價致傷效果。于傷后應用鈣通道阻滯劑地爾硫卓進行干預，通過監(jiān)測傷后心功能的變化情況及細胞內(nèi)[Ca2+]I濃度，評價MC后應用地爾硫卓在改善心功能、保護受損

5、心肌方面的作用；應用Western blot和RT-PCR 方法對心肌細胞結(jié)蛋白及結(jié)蛋白mRNA表達進行檢測，評估心肌細胞骨架結(jié)構(gòu)的破壞情況，通過傷后用藥組與非用藥組的比較，進一步探討其與傷后心肌細胞鈣超載及心臟收縮舒張功能障礙發(fā)生的關(guān)系。
　　 主要結(jié)果：①應用BIM-Ⅲ小型多功能生物撞擊機以220Kpa 驅(qū)動壓驅(qū)動彈頭對大鼠胸部劍突左側(cè)0.5cm 處撞擊，所建立的大鼠胸部撞擊致心臟損傷動物模型在傷后2h出現(xiàn)心功能下降、血流動

6、力學紊亂，心臟損傷的AIS 評分4-5分，符合胸部撞擊傷中至重度心肌挫傷的臨床特征。②大鼠傷后心肌細胞內(nèi)[Ca2+]I 顯著升高，傷后4h 達峰值后開始下降，但24h后仍高于正常（P<0.05），傷后應用地爾硫卓（D組）可顯著降低傷后4-12h細胞內(nèi)[Ca2+]I濃度；動物致傷初期出現(xiàn)心率下降，而后逐步升高，傷后8h 心率最快、24h 仍低于正常，D組顯著降低動物傷后4-12h 心率（P<0.01）；單純致傷（T組）左心室收縮期末壓(L

7、VESP)明顯降低，4h 達最低值后開始上升，傷后24h恢復至傷前水平， D組LVESP與T組對比無明顯變化；T組左心室舒張期末壓(LVEDP）傷后升高，4h 達峰值，此后下降，但傷后24h 仍未恢復至傷前水平，D組傷后24h降至正常范圍。T ③組心肌細胞結(jié)蛋白的表達降低，傷后8h 最低，但傷后24h 結(jié)蛋白表達增高明顯，至傷后48h 其表達量高于傷前（P<0.05）；結(jié)蛋白mRNA 傷后呈逐步增高趨勢，傷后24h 達峰值，D組結(jié)蛋白在

8、傷后8h表達高于T組（P<0.01）、48h 低于T組（P<0.05），結(jié)蛋白mRNA在傷后24-48h 低于T組（P<0.05）；心肌組織結(jié)蛋白免疫組化顯示，傷后心肌細胞結(jié)蛋白表達在傷后初期呈灶狀缺失，且隨時間延長其表達降低，但傷后48h 結(jié)蛋白表達明顯增強出現(xiàn)雜亂聚集。
　　 結(jié)論：①本實驗建立的大鼠胸部撞擊致心臟損傷動物模型具有模擬傷情穩(wěn)定，操作簡便，可重復性良好等特點；MC ②后早期應用鈣通道阻滯劑地爾硫卓能顯著降低傷后