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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察應(yīng)用原代提取的大鼠的心臟周細(xì)胞對(duì)心肌梗死的治療效果,應(yīng)用SD大鼠的心肌梗死模型,將周細(xì)胞植入大鼠梗死的心肌,研究周細(xì)胞移植對(duì)梗死后心肌組織的影響:1)移植前后心功能變化2)梗死區(qū)膠原纖維及炎癥細(xì)胞變化3)梗死區(qū)血管密度變化。
方法:原代提取的心臟周細(xì)胞(pericyte),來(lái)源于三周齡的SD大鼠,經(jīng)膠原酶消化2次后分離培養(yǎng),擴(kuò)增數(shù)量至第三代。取第三代周細(xì)胞做移植準(zhǔn)備。用20只SD大鼠(雄性)做急性心肌梗死模型,將20
2、只SD大鼠隨機(jī)分為兩組,每組10只大鼠。1)周細(xì)胞組:應(yīng)用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎法建立SD大鼠的心肌梗死模型,結(jié)扎后5分鐘,在梗死區(qū)及梗死周?chē)鷧^(qū)分別注入周細(xì)胞,然后逐層縫合肌肉皮膚,關(guān)閉胸腔。2)對(duì)照組:也結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支建立SD大鼠的心肌梗死模型,結(jié)扎后5分鐘,在梗死區(qū)和梗死周?chē)鷧^(qū)注入磷酸鹽緩沖溶液(PBS),然后關(guān)閉胸腔。兩組SD大鼠均于移植前和移植后4周做心臟超聲檢查,檢測(cè):左心室收縮末期容積,左心室舒張末期容積,左心室短軸縮短
3、率,左心室射血分?jǐn)?shù)。術(shù)后4周取大鼠的心臟組織做冰凍切片,并做抗CD31的免疫熒光染色,觀察梗死區(qū)的血管密度。做Masson染色觀察梗死區(qū)膠原纖維變化,做HE染色觀察炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。
結(jié)果:1)與對(duì)照組組對(duì)比,移植前后周細(xì)胞組大鼠左心室舒張末期容積、左心室收縮末期容積擴(kuò)大較小,左心室短軸縮短率及射血分?jǐn)?shù)也僅有很少的降低。2)與對(duì)照組對(duì)比,周細(xì)胞植入組梗死區(qū)域心肌纖維化較少。3)與對(duì)照組比較,HE染色顯示周細(xì)胞植入組梗死區(qū)域炎性細(xì)胞
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