維生素D代謝通路相關(guān)基因多態(tài)與孕早期血漿維生素D水平的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:
　　維生素D缺乏是一個(gè)全球性的健康問(wèn)題，全世界有超過(guò)十億人維生素D缺乏或者不足。維生素D缺乏與多種骨骼肌肉相關(guān)疾病和非骨骼肌肉疾病發(fā)生相關(guān)。由于女性戶外活動(dòng)較少且常采取防曬措施，而且孕婦在孕期維生素D的需求明顯增加，所以維生素D缺乏在妊娠期孕婦中非常普遍。孕婦在妊娠期維生素D的缺乏或不足可能與先兆子癇、妊娠期糖尿病、炎癥性疾病等妊娠期并發(fā)癥和早產(chǎn)、低出生體重等不良妊娠結(jié)局相關(guān)，甚至還會(huì)影響母親和子代遠(yuǎn)期疾病的發(fā)生，包括癌癥

2、、糖尿病、炎癥疾病、過(guò)敏性疾病、神經(jīng)退行性疾病等。
　　血漿25(OH)D被認(rèn)為是代表體內(nèi)維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)。環(huán)境因素包括季節(jié)、地理緯度、維生素D攝入量等，以及遺傳因素都會(huì)影響體內(nèi)的維生素D水平。家庭研究和雙生子研究發(fā)現(xiàn)血漿25(OH)D水平變異中遺傳因素估計(jì)約占23-80％。既往研究發(fā)現(xiàn)NADSYN1、DHCR7、GC、CYP2R1和VDR等維生素D代謝通路相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)性與血漿25(OH)D水平存在顯著的關(guān)聯(lián)。

3、但是研究對(duì)象主要是普通成年人，且結(jié)論不一致。目前，在孕婦人群中尚未見(jiàn)對(duì)維生素D代謝通路相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)性與孕期血漿25(OH)D水平之間的關(guān)聯(lián)進(jìn)行的系統(tǒng)性的研究。
　　因此，本研究以浙江省舟山市婦幼保健院為研究現(xiàn)場(chǎng)，采用橫斷面研究的設(shè)計(jì)探討孕婦維生素D代謝通路相關(guān)基因（NADSYN1、DHCR7、GC、CYP2R1、CYP3A4、CYP27A1、CYP27B1、LRP2、CYP24A1、VDR）多態(tài)性與孕早期血漿25(OH)

4、D水平之間的關(guān)聯(lián);并且對(duì)可能的基因-環(huán)境及基因-基因的交互作用與血漿25(OH)D水平之間的關(guān)聯(lián)進(jìn)行分析，為孕期合理補(bǔ)充維生素D提供更多的科學(xué)依據(jù)。
　　材料和方法:
　　本研究以浙江省舟山市婦幼保健院為研究現(xiàn)場(chǎng)，在知情同意后，通過(guò)面對(duì)面訪談獲得流行病學(xué)調(diào)查問(wèn)卷資料（包括研究對(duì)象的一般社會(huì)人口學(xué)特征、生活行為方式、身高體重等基本信息），并采集孕早、中、晚期空腹血樣。從2011年8月到2014年4月期間納入隊(duì)列的孕婦中，隨機(jī)選

5、擇759例已完成分娩的孕婦，檢測(cè)其孕早期血漿25(OH)D水平，并且利用孕早期白細(xì)胞血樣檢測(cè)相關(guān)基因多態(tài)。本研究中，采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析法測(cè)定孕早期血漿25(OH)D水平。通過(guò)文獻(xiàn)閱讀、數(shù)據(jù)庫(kù)檢索等方法選擇基因的SNP位點(diǎn)并且運(yùn)用基于MALDI-TOF-MS技術(shù)的美國(guó)Sequenom公司的MassARRAY系統(tǒng)完成SNP分型。采用多元線性模型分析、又生分析、多因子降維分析等方法，對(duì)基因多態(tài)的主效應(yīng)、基因-環(huán)境、基因-基因交互作用

6、與血漿25(OH)D水平之間的關(guān)聯(lián)進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:
　　本研究納入的759名孕早期孕婦的平均年齡為28.30±3.06歲，平均孕周為11.51±0.63周，在春季、夏季、秋季和冬季采血人數(shù)分別為168、192、195和204人，分別占總?cè)藬?shù)的22.13％、25.30％、25.69％和26.88％。孕婦的血漿25(OH)D水平平均為15.64±6.52 ng/mL，其中593人維生素D缺乏(25(OH)D＜20 ng/m

7、L)，另外166人的血漿25(OH)D≥20 ng/mL，分別占78.13％和21.87％。
　　采用線性回歸模型分析基因多態(tài)與血漿25(OH)D水平的關(guān)聯(lián)，在檢測(cè)的49個(gè)SNPs中，其中10個(gè)SNP與血漿25(OH)D水平顯著相關(guān)。在GC基因的多態(tài)分析中，經(jīng)年齡、孕前BMI、采血季節(jié)、體育鍛煉情況調(diào)整后，與rs16846876的AA基因型相比，AT基因型和TT基因型攜帶者的血漿25(OH)D水平分別平均降低1.22ng/mL和2

8、.72 ng/mL(P=0.0121;P=0.0006);與rs17467825的AA基因型攜帶者相比，GA基因型攜帶者和GG基因型攜帶者的血漿25(OH)D水平也降低(β=-1.95，P＜0.0001;β=-2.88，P=0.0003)。結(jié)果還顯示，與rs17467825連鎖強(qiáng)度很強(qiáng)(r2＞0.98)的SNPs包括rs2282679、rs3755967、rs2298850、rs4588的多態(tài)均與血漿25(OH)D水平相關(guān)，并且其基因型

9、與血漿25(OH)D水平的相關(guān)趨勢(shì)與rs17467825的相似。另外，與rs7041的AA基因型相比，CA基因型攜帶者和CC基因型攜帶者的血漿25(OH)D水平平均升高1.80 ng/mL和2.30ng/mL(P=0.0002;P=0.0123);與rs1155563的TT基因型相比，CC基因型的攜帶者血漿25(OH)D水平較低（β=-1.80，P=0.0104）;而rs2298849的GG基因型攜帶者與AA基因型攜帶者相比，血漿25(

10、OH)D水平相對(duì)較高(β=1.44，P=0.0423)。另外在CYP3A4基因多態(tài)分析中，與rs2242480的CC基因型相比，TT基因型的攜帶者血漿25(OH)D水平較高(β=2.48，P=0.0081)。
　　單體型分析結(jié)果顯示，與GC基因單體型TTGTGTCA相比，調(diào)整可能的混雜因素后，單倍型ATAGGCTG（β=2.17，P=0.0041）、ATATGCTG(β=1.47，P=0.0110)、ACATTCTG(β=3.08

11、，P=0.0001)、ATATTTCA(β=1.99，P=0.0092)均顯著增加血漿25(OH)D水平。LRP2基因中，經(jīng)調(diào)整后，與最常見(jiàn)單倍型TCCCGCA相比，TCCCCTG單倍型顯著降低血漿25(OH)D水平(β=-1.55，P=0.0462)。但未發(fā)現(xiàn)其他基因單倍型分析中與血漿25(OH)D水平存在顯著關(guān)聯(lián)。
　　基因-環(huán)境、基因-基因交互作用的又生分析結(jié)果顯示，采血季節(jié)與rs933994-CYP27A1、rs22467

12、09-CYP3A4多態(tài)性的交互作用與血漿25(OH)D水平存在關(guān)聯(lián)。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)rs7041-GC與rs1562902-CYP2R1、rs10766197-CYP2R1、 rs2248137-CYP24A1、rs2242480-CYP3A4;rs2298849-GC與rs2246709-CYP3A4;rs2209314-CYP24A1與rs1544410-VDR之間的交互作用與血漿25(OH)D水平存在顯著的關(guān)聯(lián)。GMDR分析基因

13、多態(tài)交互效應(yīng)發(fā)現(xiàn)，由rs7041-GC、rs1155563-GC，rs1562902-CYP2R1，rs2209314-CYP24A1構(gòu)成的模型是預(yù)測(cè)血漿25(OH)D水平的最佳模型。
　　結(jié)論:
　　在孕婦人群中，維生素D代謝通路基因多態(tài)性與孕早期血漿25(OH)D水平存在關(guān)聯(lián)，其中GC基因變異可能是影響孕早期血漿25(OH)D水平的主要基因變異。采血季節(jié)與維生素D代謝通路基因?qū)S生素D水平存在交互作用。研究結(jié)果仍需要進(jìn)一