車前草提取物及其有效成分的抗菌活性研究.pdf

1、車前草(Plantago asiatica L.)屬車前科植物，在民間多用干燥全草入藥。具有祛痰、明目等功效。近年來，隨著對車前草研究的不斷深入，人們從車前草中分離出了較多有效成分，但是對抗菌活性方面研究較少，并且大多數(shù)藥理研究都是以車前草粗提物為主。因此本文以分離篩選具有抗菌活性的單體化合物為目的，從而尋找到在抗菌方面具有開發(fā)價值的先導(dǎo)化合物。
　　本實驗首先對車前草全草進行甲醇冷浸法提取，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取

2、，通過抗菌實驗對萃取出的三個組分的抗菌活性依次進行活性篩選，最終確定車前草的石油醚層和乙酸乙酯層對變形鏈球菌和金黃色葡萄球菌有較好的抑制性。采用正相硅膠柱色譜、TLC薄層色譜法、反相硅膠色譜、重結(jié)晶、制備型薄層層析和羥丙基葡聚糖凝膠色譜方法，對車前草的石油醚層和乙酸乙酯層進行系統(tǒng)分離，共分離出化合物I（油酸）、化合物II（亞麻酸甲酯）、化合物III（亞油酸）、化合物IV（十六烷酸）、化合物V（山楂酸）、化合物VI（β-谷甾醇）、化合物V

3、II（齊墩果酸）和化合物VIII（熊果酸）等八個化合物。
　　首先對這八個化合物進行初步活性篩選，發(fā)現(xiàn)化合物I、化合物III、化合物V、化合物VII和化合物VIII有抗菌活性。它們對變形鏈球菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和芽孢桿菌這些革蘭氏陽性菌有較好的抑制性，其最小抑菌濃度(MIC)值為16~128μg/mL。對大腸桿菌和綠膿桿菌這些革蘭氏陰性菌也有一定的抗菌活性，其MIC值為64~256μg/mL。其中化合物V和化合物VIII對

4、大腸桿菌活性尤為突出，比對照藥硫酸鏈霉素要好，MIC值達到了64μg/mL。在對耐藥菌的活性測試中，化合物 I、化合物 V和化合物 VIII也表現(xiàn)出了抑制性，MIC值為16~128μg/mL。最后在細胞毒性實驗中發(fā)現(xiàn)，這五種化合物在相同的抗菌濃度下對細胞沒有毒性傷害；在抗氧化實驗中發(fā)現(xiàn)，化合物 VII和化合物 VIII有一定的抗氧化性；在細菌耐藥性的測試中發(fā)現(xiàn)，化合物 VIII不易產(chǎn)生耐藥性，其最小殺菌濃度(MBC)值與MIC值幾乎相等