基于iTRAQ技術的子癇前期子代血管功能紊亂的定量蛋白質組學研究.pdf

1、本文從以下兩部分進行論述：
　　第一部分 基于iTRAQ-2D-LC-MS/MS的子癇前期子代臍動脈血管的蛋白質組學分析
　　流行病學調查顯示子癇前期對母親和胎兒的健康都有重大影響，宮內(nèi)的不良環(huán)境可能導致成人心血管疾病的發(fā)生，但對其分子機制知之甚少。因此，我們利用定量蛋白質組學技術試圖深入的研究子癇前期子代心血管功能紊亂的分子機制。iTRAQ結果顯示我們總共鑒定到1521個蛋白質，其中1496個蛋白質具有定量信息。進一步分析

2、得到在臍動脈血管中有53個具有顯著差異表達的蛋白質，其中22個蛋白質上調表達，31個蛋白質下調表達。通過利用IPA軟件進行深入的生物信息學分析，我們發(fā)現(xiàn)了一組與心血管密切相關的蛋白質(SLIT3,CD99,FN1,DAPK3,CRKL,FBN1,C1 QBP,CSNK2B,AKR1B1,TMOD1,LRPAP1，F(xiàn)BN2，PRKCA)，這些蛋白質與心血管疾病和功能密切相關，功能方面主要是與血管生成（angiogenesis）最為相關，相

3、關疾病方面則是跟高血壓(hypertension)聯(lián)系最為密切。我們對AKR1B1，F(xiàn)N1，F(xiàn)BN1這三個蛋白質進行了western blot的驗證，結果與蛋白質組學結果一致。在對這些心血管功能相關蛋白的上游調控分析中，我們發(fā)現(xiàn)miR-9-5p可以抑制AKR1B1，F(xiàn)BN1，F(xiàn)BN2，PRKCA這四個蛋白的表達。心血管功能相關蛋白的相互作用網(wǎng)絡顯示FN1蛋白處于軸心位置。研究結果對揭示子癇前期子代的血管功能紊亂提供了新的研究視角。

4、>　　第二部分 基于子癇前期動物模型的成年子代血管的蛋白質組學分析
　　心血管疾病的胚胎起源是全世界備受重視的研究領域。流行病學調查顯示子癇前期所造成的宮內(nèi)不良環(huán)境會導致胎兒的血管功能出現(xiàn)不同程度的紊亂，從而加大了子代發(fā)育過程中心血管疾病發(fā)生的風險，但其分子機制仍有待研究。在前期研究中，我們分析了子癇前期子代的臍動脈差異蛋白表達譜，為了更深入的研究子癇前期子代成年后的血管功能變化，我們建立了子癇前期的動物模型，喂養(yǎng)子代至成年（1年

5、）后，我們收集其胸主動脈進行定量蛋白質組學的研究。iTRAQ結果顯示我們總共鑒定到1825個蛋白質，進一步分析可知有106個具有顯著差異表達的蛋白質，其中75個蛋白質上調表達，31個蛋白質下調表達。通過IPA軟件的疾病與功能分析，我們發(fā)現(xiàn)差異表達蛋白中有20個心血管疾病和功能都有明顯相關性。其中血管生成(angiogenesis)是心血管相關功能中最為密切的，相關疾病方面則是跟動脈阻塞(occlusion of artery)和動脈粥樣