氨氯地平對C57小鼠黑色素瘤B16抗腫瘤轉移作用的研究.pdf

1、目的：探討鈣通路阻滯劑(calcium channel blocker,CCB)氨氯地平對C57小鼠黑色素瘤B16的抗腫瘤轉移作用以及其相關機制的研究,為氨氯地平治療高轉移株的治療提供了相應的理論基礎。
　　 方法：將B16細胞接種于C57小鼠右腹股溝皮下(2×106/只)將64只小鼠隨機分成對照組,以及三個劑量治療組。對照組從腫瘤種植第2天起灌胃給予生理鹽水0.2ml/只;治療組灌胃給予氨氯地平其劑量分別為1 mg/kg,3

2、mg/kg和10 mg/kg,每日1次,每次0.2ml,共21天,給藥期間觀察小鼠成瘤,進食,及身體情況。于腫瘤種植第22天斷頸處死小鼠,觀察對照組和治療組的肺轉移情況,計數肺轉移結節(jié)數以及各組的抑瘤率;體外進行抑制血小板聚集實驗研究;建立血小板免疫粘附小鼠黑色素細胞瘤B16細胞實驗模型,比較藥物作用前后粘附能力的差異;免疫組織化學檢測治療組和對照組腫瘤組織IL-8蛋白的表達水平;RT-PCR檢測各個實驗組腫瘤組織的IL-8mRNA的表

3、達情況;Western Blot檢測各組腫瘤組織的ERK1/2,磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)表達水平。
　　 結果：體內實驗結果顯示,與對照組相比氨氯地平可明顯抑制高轉移株黑色素瘤B16的增殖和自發(fā)性肺轉移作用,并成劑量依賴性；體外實驗結果顯示,與對照組相比氨氯地平可顯著抑制小鼠黑色素瘤B16誘導的小鼠血小板聚集以及血小板與小鼠黑色素瘤B16細胞的粘附作用；免疫組織化學檢驗結果顯示,與對照組相比IL-8蛋白表達明顯減弱

4、(P＜0.05),隨著藥物劑量的增加IL-8蛋白表達逐漸減弱;PCR結果顯示,各個治療組的IL-8mRNA表達也明顯低于對照組(P＜0.05),且隨著藥物劑量增加IL-8mRNA的表達逐漸減弱；Westem Blot檢測結果表明治療組與對照組相比p-ERK1/2表達減弱,并且隨著藥物劑量增加p-ERK1/2表達成逐漸減弱趨勢,而ERK1/2的表達各個組之間沒有顯著性差異。
　　 結論：氨氯地平可劑量依賴性的抑制小鼠黑色素瘤B16