胚胎干細胞體外定向誘導分化模型的建立及其相關(guān)因子的鑒定.pdf

1、山東大學碩士學位論文胚胎干細胞體外定向誘導分化模型的建立及其相關(guān)因子的鑒定姓名：郭曉霞申請學位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學指導教師：張紅衛(wèi)賀福初2000.4.1胚胎干細肫體外定向量導分化輳型的建立覆其相關(guān)因子的l定擅要／細胞分化是生物體發(fā)育過程的重要事件，目前對其早期細胞決定及分化的分子機制仍不很了解，建立一個可靠有效的細胞模型將極大地促進人們對細胞分化中分子調(diào)控機制的認識與了解。胚胎干細胞(ES)是一種多潛能干細胞，在合適的培養(yǎng)條件下，

2、ES細胞可以定向誘導分化形成包括神經(jīng)細胞在內(nèi)的多種細胞類型，對于研究哺乳動物早期神經(jīng)發(fā)生及分化提供了良好的實驗體系。維甲酸(retinoicacid，RA)是維生素A的衍生物，可抑制細胞生長、促進細胞發(fā)育、導致細胞凋亡等?！槐狙芯坷肦A對Es細胞的誘導分化作用，建立了ES細胞的體外分化模型。利用該模型，應(yīng)用蛋白質(zhì)組研究技術(shù)，對細胞分化，主要是神經(jīng)分化的發(fā)生及調(diào)控機理進行了初步的探索。l本課題首先建立了RA體外誘導Es細胞定向向神經(jīng)細胞

3、分化的模型；并利用此模型系統(tǒng)提取了4個不同分化時期細胞的總蛋白質(zhì)：即未分化的Es細胞、分化初期細胞、神經(jīng)分化啟動時期的細胞及神經(jīng)分化末期的細胞。應(yīng)用二維電泳技術(shù)(twodimensionalelectrophoresis，2DE)，我們首先初步建立了這4個分化時相的細胞的蛋白質(zhì)圖譜，并迸一步比較了它們之間蛋白質(zhì)圖譜的表達差異，對其中24個蛋白差異點進行了肽質(zhì)量指紋譜的鑒定，初步確定了其中9種蛋白質(zhì)。其中4種蛋白屬于細胞骨架蛋白，即微管蛋