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1、廈門(mén)大學(xué)碩士學(xué)位論文角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子在大腸桿菌中的表達(dá)、純化及生物學(xué)活性研究姓名:黃新強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:鄭忠輝宋思揚(yáng)2001.7.1ABSTR^CTUExpressionofKeratinocyteGrowthFactorinEscherichiacolianditsPurificationandBioactivityABSTRACTKeratinocyteGrowthFactor(KGF)isamembero
2、fFibroblastGrowthFactor(FGF71Byactingpredominantlyinaparaerinen%annerKGFcxtnstimulatetheproliferation,differentiationandmigratinnofepithelialceilsAseriousstudieshaveprovidedinsightintothefunctionofKGFinr礎(chǔ)processesofvario
3、ustissuesandorgarts,ineludingskin,cornea,bowelInadditionitiSaprotectivefactorforgastrointestinalinjuryinducedbyradiationandchemotherapyInterestinproducing】argeamountandbioactiveKGFthrou曲geneticengineeringmethodhasbeenhei
4、ghtenedduetothelimitedamountofKGFinthebodyBasedonpreviouswork,thisP卵erfocusontheexpressionpurificationandbioactivetestofKGFfor也esakeofprovidinggroundworkforfuturestudyBychangingtheinducingtemperatureinducer1PTGconcentrat
5、ionthedensityofbacteriaandinducingtime,thesatisfyingconditionforexpressionofsolublefusionproteinGSH(GFcouldbeObtainedat25℃03mmol,LIPTG,OD600equalsto097,5hinducingtimeUndertheimprovedconditionthesolubleGSTKGFcomprisedabou
6、t420oftotaleellularprotelnand25ragGSTKGFCOuldbeharvestedinlLfermentationAmethodwhichcombinedtwostepofamIlitychromatographyandtrypsinincubationWasusedtoachieveKGFpurificationsincethefusionproteinGSTKGFCOuldbindtoGSHSephar
7、oso4BandHeparinSepharosaCL6BandHeparinSepharoseCL石BprotectstheactivecorcofKGFfrom自啊)sinproteolysisthe17KDKGFderivedfromGSTKGFwaspurifiedtohomogeneity52ragpurifiedKGFatotalrecoveryof泓KGF懈harvestedWrestemBlotanal)|rsisshow
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