海濱雀稗體細胞突變體SP2008-3特性分析及誘導機制初探.pdf

1、海濱雀稗(Paspalum vaginatium Sw.)原產(chǎn)于美洲，是目前已知耐鹽能力最強的草坪草種。由于現(xiàn)有二倍體種質(zhì)自交不親和、同一屬內(nèi)不同種之間雜交不能產(chǎn)生有活力的種子或種子發(fā)芽率極低等原因，常規(guī)育種進展緩慢。秋水仙素作為一種化學誘變劑，既可以誘導多倍體又可以誘發(fā)基因突變，因此，被廣泛應用于植物育種工作中。
　　 本試驗以海濱雀稗體細胞突變體SP2008-3為材料，以Adalayd為對照，進行了植物學特性、葉片表皮氣孔器

2、特性比較，以及染色體計數(shù)分析和RAPD分子鑒定;對體細胞突變體SP2008-3進行了耐鹽性評價;并研究了不同秋水仙素濃度和處理時間對愈傷組織細胞核質(zhì)比、細胞核異常率、愈傷組織褐化率以及綠芽和綠苗分化率的影響。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1) SP2008-3與對照品種Adalayd植物學特征差異顯著。與Adalayd相比，SP2008-3匍匐莖節(jié)間長、莖直徑分別減小34.77％和11.76％，葉片長度、寬度分別增加22.55％和

3、11.11％，差異顯著，直立莖節(jié)間長、莖直徑無顯著差異;葉片上表皮氣孔器密度增加20.58％，氣孔器長度顯著減小9.64％，氣孔器寬度顯著減小6.31％，差異均顯著;葉片下表皮氣孔器密度增加40.62％，氣孔器長度和寬度分別減小6.73％和5.33％，均呈顯著性差異。RAPD分析結(jié)果表明，采用隨機引物S369擴增，SP2008-3缺失一條約1100bp的條帶，表明其在DNA水平上與Adalayd存在差異。
　　 (2)不同濃度海

4、鹽脅迫42d后，各海鹽濃度處理下，海濱雀稗SP2008-3葉長與0g/L(對照)無顯著差異;Adalayd葉長僅在34g/L處理下顯著小于對照，其余各海鹽處理與對照差異不顯著;SP2008-3葉寬顯著低于對照，Adalayd葉寬在13.6g/L處理下與對照差異不顯著，其余各海鹽處理均顯著小于對照;SP2008-3匍匐莖節(jié)間長和直徑均顯著小于對照;Adalayd匍匐莖節(jié)間長顯著小于對照;Adalayd匐莖直徑呈先下降后升高再下降的變化趨勢

5、，海鹽濃度13.6g/L和20.4g/L處理匍匐莖直徑與對照差異不顯著，其余各海鹽濃度處理均顯著小于對照。
　　 相同海鹽濃度處理時，SP2008-3葉長、葉寬、匍匐莖節(jié)間長和匍匐莖直徑在13.6g/L時均顯著小于Adalayd，其余各海鹽濃度處理下，SP2008-3和Adalayd無顯著差異;各海鹽濃度處理下，SP2008-3和Adalayd根系干重無顯著差異;當海鹽濃度≤6.8g/L時，SP2008-3莖、葉干重顯著小于Ad

6、alayd，當海鹽濃度≥13.6g/L時，兩者各部分生物量變化無顯著差異;由根冠比變化得出，SP2008-3和Adalayd地上部分對海鹽脅迫的敏感程度高于根系部分。
　　 (3)處理時間相同的條件下，與0mg/L(對照)相比，不同秋水仙素濃度處理下的愈傷組織細胞核質(zhì)比差異顯著。其中，處理時間為1d時，秋水仙素濃度為500mg/L和1000mg/L時的愈傷組織細胞核質(zhì)比顯著大于對照，且處理間差異顯著，其余各處理時間下愈傷組織細胞

7、核質(zhì)比隨秋水仙素濃度的增加顯著減小;愈傷組織細胞核異常率隨秋水仙素濃度的增加均有不同程度的上升。同一秋水仙素濃度處理下，愈傷組織細胞核質(zhì)比隨處理時間的增加顯著降低或差異不顯著;各處理時間下的愈傷組織細胞核異常率變化不盡相同。
　　 愈傷組織褐化率，隨秋水仙素濃度和處理時間的增加顯著升高。其中，500mg/L秋水仙素處理1d、3d、5d、7d，1000～3000mg/L秋水仙素處理1d時，愈傷組織褐化率較低為11％～33％;400

8、0mg/L秋水仙素處理1d、3d、5d、7d時，愈傷組織褐化率較高為59％～88％。不同秋水仙素濃度和處理時間對愈傷組織綠芽、綠苗分化率影響不一。與對照相比，秋水仙素濃度為500～2000mg/L，處理時間為3d時的愈傷組織綠芽分化率較低為7％～10％;秋水仙素濃度為3000mg/L，處理時間為1d、3d、5d時的綠芽分化率較高27％～58％;500mg/L秋水仙素濃度處理1d、3d、5d和1000～2000mg/L秋水仙素處理1d時，