版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、燕麥?zhǔn)侵匾募Z飼兼用作物,構(gòu)建燕麥EMS突變體庫對燕麥功能基因組學(xué)研究和遺傳改良有重要意義。本實驗利用化學(xué)誘變劑甲基磺酸乙酯(EMS,ethyl methane sulfonate)處理燕麥品種花早2號,對M2植株進(jìn)行全生育期調(diào)查,對部分株系進(jìn)行突變位點(diǎn)的分子檢測,主要結(jié)果如下:
1、燕麥EMS處理和突變類型鑒定。利用濃度為0.7%的EMS溶液處理花早2號種子15h,獲得了4083株的M1材料;對其中的2000個單株種植M2株
2、行,并進(jìn)行全生育期調(diào)查,鑒定其表型變化;對其中2份黃化突變材料種植了M3家系,進(jìn)行黃化突變性狀的穩(wěn)定性驗證。結(jié)果表明,燕麥經(jīng)EMS處理后表型變異巨大,在M2代材料共發(fā)現(xiàn)表型突變材料196份,表型變異率為9.8%,變異類型非常豐富,包括幼苗習(xí)性、葉片、分蘗數(shù)、株高、穗部形態(tài)以及成熟期等多個突變類型。其中,對部分M3材料種植后證實,突變的黃化苗特性可以穩(wěn)定遺傳。
2、燕麥突變體庫的TILLING檢測。從芹菜中提取CELⅠ內(nèi)切酶粗提
3、物,以合成的含有單個堿基差異的片段為模板對提取的CELⅠ內(nèi)切酶進(jìn)行活性檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)所提取的內(nèi)切酶具有較高的活性;同時,對酶切反應(yīng)的溫度、酶切時間、提取物的用量等條件進(jìn)行探索,構(gòu)建了酶切檢測體系。利用該體系,對突變體庫進(jìn)行TILLING檢測,共篩選出兩個與黃化苗相關(guān)突變位點(diǎn)。
3、突變體的HRM檢測。根據(jù)水稻黃化基因和株高基因進(jìn)行特異性引物設(shè)計98對引物,最終篩選出6對引物可以擴(kuò)增出單一條帶。以這6對引物對表型發(fā)生變異的部分M
4、2材料進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物利用HRM檢測,共檢測到25個黃化突變位點(diǎn)。對這些突變樣品進(jìn)行克隆測序,與野生型相比,其中有19個位點(diǎn)的DNA序列發(fā)生變異。對測序片段進(jìn)行BLAST序列比對,發(fā)現(xiàn)有4個樣品的擴(kuò)增片段與燕麥chlG基因的部分片段僅有單堿基差異,該基因(chlG)為葉綠素合成酶基因。其中黃化突變體M0368、M0782、M1888和M1910種植M3株系,結(jié)果表明這一突變性狀能夠穩(wěn)定遺傳。
以上結(jié)果表明,本研究構(gòu)建了燕麥花
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 黃瓜EMS誘變突變體庫及TILLING平臺的初步構(gòu)建.pdf
- EMS誘導(dǎo)菊花突變體庫的構(gòu)建和光周期不敏感突變體的分子鑒定.pdf
- 玉米Mutator插入突變體庫構(gòu)建及抗旱突變體的篩選分析.pdf
- 鹽芥突變體庫的構(gòu)建及突變體的篩選.pdf
- 甜瓜突變體庫的構(gòu)建及黃化突變體鑒定和表型分析.pdf
- 水稻“9311”突變體的篩選和突變體庫的構(gòu)建.pdf
- EMS誘變甘蔗突變體庫的構(gòu)建及其SSR引物的篩選.pdf
- 稻瘟菌插入突變體庫的構(gòu)建及生長緩慢突變體的篩選.pdf
- 玉米突變體庫構(gòu)建及株型突變體鑒定與基因定位.pdf
- 稻瘟菌REMI突變體庫的構(gòu)建和突變體篩選.pdf
- 擬南芥激活突變體庫及頂端優(yōu)勢缺失突變體的分子分析.pdf
- 利用EMS誘變構(gòu)建甘藍(lán)型油菜突變體庫的初步研究.pdf
- 產(chǎn)黃青霉突變體庫的構(gòu)建及鑒定.pdf
- 煙草激活標(biāo)簽突變體庫的構(gòu)建與分析.pdf
- 六倍體小麥突變體庫的構(gòu)建及葉形—穗形突變體233737的遺傳分析.pdf
- EMS誘導(dǎo)黃瓜突變體的初步研究.pdf
- 大白菜EMS突變體庫的創(chuàng)建與篩選鑒定.pdf
- 甘藍(lán)型油菜EMS突變體庫的構(gòu)建及TILLING、EcoTILLING技術(shù)的應(yīng)用研究.pdf
- 小麥EMS誘變?nèi)后w的構(gòu)建及關(guān)鍵性狀突變體的篩選.pdf
- 水稻突變體庫的構(gòu)建和旁鄰序列分析.pdf
評論
0/150
提交評論