玉米突變體庫構(gòu)建及株型突變體鑒定與基因定位.pdf

1、本研究選用玉米優(yōu)良自交系B73和鄭58作為誘變親本，甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate，EMS)作為誘變劑，以EMS濃度為0.067％的EMS-石蠟油誘變玉米成熟花粉，構(gòu)建玉米EMS突變體庫。B73和鄭58兩個突變體庫的M2代含有株高、葉色、葉型、抗性、分蘗、表皮毛等相關(guān)的表型豐富的突變體，肉眼可見突變體的比率分別為1.038％、0.865％。尤其是一些突變體表現(xiàn)出優(yōu)良農(nóng)藝性狀，如葉夾角小、棕色葉中脈、矮化、抗

2、性，為玉米育種提供了寶貴的種質(zhì)資源。
　　B73小葉夾角變突變體rla1、rla2表型相似，其葉片石蠟切片顯示rla1、rla2的葉舌區(qū)遠(yuǎn)軸面厚壁組織較薄。rla1、rla2較野生型B73耐密植，在66667株/hm2、83333株/hm2和100000株/hm2種植密度下，單位面積產(chǎn)量均高于對照，且隨種植密度增大而提高，其最大密植度在100000株/hm2以上。遺傳學(xué)分析顯示rla1、rla2都是單基因隱性突變，而且是等位基因突

3、變。
　　B73矮化突變體zmd1比野生型矮40％，節(jié)間數(shù)目比野生型少2節(jié)，節(jié)長變短，葉片長寬比變小。遺傳學(xué)分析表明zmd1為單基因隱形突變。用MutMap方法克隆矮化基因ZMD1，從zmd1與B73的F2群體中選出24株矮化個體，等量混合其DNA，建立測序文庫，進(jìn)行高通量測序，獲得SNP位點(diǎn)，結(jié)合SNP指數(shù)與SNP位點(diǎn)分布分析得到2個候選基因。在擴(kuò)大的F2群體驗證候選基因與表型的連鎖關(guān)系，確定目的基因為ZMD1，該基因編碼一個細(xì)