家兔心衰心肌細(xì)胞鈣滲漏機(jī)制初步研究.pdf

1、目的：探討心衰家兔心肌細(xì)胞鈣滲漏與鈣調(diào)蛋白依賴性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)及蛋白激酶A(PKA)表達(dá)和活性的關(guān)系，以闡明心衰心肌細(xì)胞鈣滲漏發(fā)生的可能機(jī)制。
　　 方法：
　　 (1)實(shí)驗(yàn)分組：30只家兔被隨機(jī)分為2組：假手術(shù)組(n=15)和心衰組(n=15)；聯(lián)合應(yīng)用主動(dòng)脈瓣破瓣術(shù)及腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)建立家兔心衰模型，共觀察7周。
　　 (2)家兔心功能測(cè)定：利用心導(dǎo)管術(shù)及心臟多普勒觀察家兔血流動(dòng)力學(xué)變化及心臟功能。

2、>　　 (3)家兔心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)(SR)鈣滲漏測(cè)定：應(yīng)用鈣成像系統(tǒng)測(cè)定心肌細(xì)胞SR鈣滲漏程度。
　　 (4)蛋白激酶表達(dá)和活性的測(cè)定：分別采用蛋白免疫印跡法(Western blot)和γ-32P摻入法測(cè)定心肌組織鈣調(diào)蛋白依賴性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和蛋白激酶A(PKA)的蛋白表達(dá)水平和活性。
　　 結(jié)果：
　　 (1)兩組家兔心功能的比較：與假手術(shù)組相比，心衰組家兔左室舒張末壓(LVEDP)(mmHg：-6.0

3、0±3.70 vs25.10±4.33)明顯升高(P<0.05)；左室射血分?jǐn)?shù)(EF)(％：72.35±3.27 vs43.67±7.12)明顯降低(P<0.05)。
　　 (2)兩組家兔心肌細(xì)胞SR鈣滲漏程度的比較：經(jīng)釕紅干預(yù)后，與假手術(shù)組相比，心衰組家兔SR鈣回?cái)z量(nmol/l：98.64±20.15 vs221.67±19.32)顯著增加(P<0.01)。
　　 (3)兩組家兔心肌組織蛋白激酶表達(dá)和活性比較：與假

4、手術(shù)組相比，心衰組家兔心肌組織CaMKⅡ蛋白表達(dá)(RCaMKⅡ/actin：0.78±0.20 vs1.24±0.34)和活性(pmol·min-1·μg-1:2.20±0.14 vs4.12±0.19)均明顯增加(P<0.05)；PKA蛋白表達(dá)(RPKA/actin：0.89±0.12 vs0.59±0.21)和活性(pmol·min-1·μg-1:1.83±0.07 vs1.01±0.03)均明顯降低(P<0.05)。