江南卷柏提取物中穗花杉雙黃酮的藥動學(xué)研究.pdf

1、江南卷柏是卷柏科卷柏屬植物江南卷柏(Selaginella moellendorfiiHieron)的干燥全草,分布于長江以南各地、北至陜西南部。有清熱解毒,活血消腫的功效,用于急性傳染性肝炎、胸脅腰部挫傷、全身浮腫、血小板減少等癥狀。
　　 江南卷柏的主要藥效成分是黃酮類化合物,穗花杉雙黃酮是有效成分之一,具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、降血糖和擴張血管等多種生物活性,但目前對其在藥動學(xué)方面的研究尚不多見。
　　 為

2、闡明江南卷柏中穗花杉雙黃酮在體內(nèi)的藥動學(xué)規(guī)律,我們給家兔灌胃含有穗花杉雙黃酮的黃酮提取物,用高效液相色譜儀檢測家兔血清中的藥物濃度,并對其進(jìn)行藥代動力學(xué)研究。該研究為改進(jìn)新藥設(shè)計,優(yōu)選給藥方案提供了依據(jù),以便于該藥物充分發(fā)揮其在臨床用藥中的療效。
　　 1.江南卷柏黃酮提取物的制備
　　 將江南卷柏原藥材粉碎、過篩,用85％的乙醇回流提取2次,每次1小時,再用石油醚脫脂3次,然后用稀醇沉淀純化,將沉淀物減壓干燥,即得黃酮

3、提取物粉末。
　　 經(jīng)高效液相色譜儀測出,該提取純化方法得到的提取物中含穗花杉雙黃酮23.41%。
　　 2.高效液相色譜法測定血清中穗花杉雙黃酮的方法建立
　　 血清樣品的預(yù)處理:先用飽和NaH2PO4溶液沉淀蛋白,再用乙酸乙酯萃取,然后4000rpm離心10min,再重復(fù)萃取一次,氮氣吹干。殘留物用500μL甲醇溶解,0.45μm岬濾膜過濾,取20μL進(jìn)行液相分析。
　　 色譜條件:Cosmosil5

4、C18-MS-Ⅱ waters(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱,以乙腈為流動相A,水溶液(含2%的四氫呋喃,0.1%的三氟乙酸)為流動相B進(jìn)行梯度洗脫,pH為2.2,流速為1.0 mL·min-1,柱溫為30℃,檢測波長為335nm,進(jìn)樣量為20μL。
　　 結(jié)果得出,穗花杉雙黃酮在血清中的線性范圍為1.024～41ng(r=0.9995,n=5);低、中、高三個濃度的絕對回收率分別為(59.17±0.41)%、(54.

5、51±0.65)%、(51.52±0.69)%,相對回收率分別為(83.98±0.98)%、(96.24±1.22)%、(100.50±1.38)%,RSD≤2%(n=6);最低檢測限為0.41ng。
　　 3.穗花杉雙黃酮在家兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究
　　 用0.5%的吐溫80溶解黃酮提取物粉末,以提取物0.30g/kg(相當(dāng)于穗花杉雙黃酮70.23mg/kg)的量給家兔灌胃,然后分別在30、45、60、75、90、12

6、0、150、180、240、360、480、720min時從耳緣靜脈取血2ml。經(jīng)血樣處理后,用HPLC檢測。得到穗花杉雙黃酮符合一室模型,其藥動學(xué)參數(shù)t1/2為(125.015±71.326)min,Ke(0.009±0.008)/min,V1/F為(99.586±59.97)L/kg,CL/F為(0.583±0.157)L/min/kg,AUC(0-t)為(125.521±34.387)mg/L·min,AUC(0-∞)為(136.