丹參提取物中有效成分的質(zhì)量控制及藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、丹參(RadixetRhizomaSalviaeMiltiorrhiza)為唇型科植物丹參(SalviamiltiorrhizaBgE.)的干燥根及根莖，主要藥效成分包括脂溶性的丹參酮類和水溶性的丹酚酸類。本文通過對(duì)不同來源藥材中兩類主要成分的含量相關(guān)性研究，提取工藝研究，藥材及提取物的主要組分及穩(wěn)定性研究，探討主要成分不同存在狀態(tài)時(shí)的相互影響，在此基礎(chǔ)上，研究了不同極性的兩類物質(zhì)的雙向載藥脂質(zhì)微球制備工藝，并對(duì)其在單用和不同比例配伍時(shí)

2、大鼠體內(nèi)外藥物動(dòng)力學(xué)及相互作用進(jìn)行了研究。 參照藥典方法對(duì)來源于主產(chǎn)區(qū)的不同產(chǎn)地的栽培丹參及市售商品丹參進(jìn)行了鑒別及化學(xué)成分含量測(cè)定。結(jié)果表明丹參藥材來源單一，薄層色譜及紅外光譜行為無明顯差異，但其主要指標(biāo)性成分含量差異較大；藥材中脂溶性指標(biāo)成分之間存在含量相關(guān)性，水溶性指標(biāo)成份之間亦存在含量相關(guān)性，而水溶性成份及脂溶性成分之間含量無相關(guān)性。 對(duì)丹參不同極性有效成份的提取工藝進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，采用超臨界二氧化碳萃取技

3、術(shù)先提取丹參中的脂溶性成分，后對(duì)藥渣進(jìn)行水溶性成份提取的先進(jìn)工藝，可使藥材中的有效成分得以充分利用。確定了超臨界提取的最佳工藝參數(shù)為：萃取壓力為25MPa，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為2.5小時(shí)，攜帶劑為為95％的乙醇；水溶性成份提取工藝為：干燥藥渣加8倍量水，浸泡4小時(shí)后，煎煮兩次，每次2小時(shí)，濾液加95％乙醇使醇濃度達(dá)60％，冷藏靜置40小時(shí)，濾液濃縮后上D101大孔吸附樹脂吸附，50％乙醇洗脫，濾液濃縮后冷凍干燥。 通過對(duì)

4、丹參藥材、脂溶性提取物及對(duì)照品的甲醇提取物穩(wěn)定性考察，表明丹參酮ⅡA及隱丹參酮易受溫度、pH、光照的影響而發(fā)生降解。與純品對(duì)比，藥材及提取物中的其他成分對(duì)丹參酮ⅡA及隱丹參酮的降解有延緩作用，弱酸環(huán)境下其穩(wěn)定性較好。 通過對(duì)丹參藥材、水溶性提取物、脂溶性提取物及對(duì)照品UPLC-ESI-MS色譜及質(zhì)譜行為研究，從中分離檢定了20個(gè)化合物，其中水溶性成份10個(gè)，脂溶性成分7個(gè)，未知3個(gè)。對(duì)指標(biāo)成分丹參酮ⅡA及丹酚酸B進(jìn)行了不同碰撞能

5、量下的ESI-MS裂解規(guī)律研究，指出丹參酮ⅡA的裂解特征是正離子模式下出現(xiàn)碎片m/z280、277、262、252、249；丹酚酸B的裂解特征是負(fù)離子模式下形成m/z519、321、339、295的碎片離子。 分別對(duì)丹參脂溶性提取物、水溶性提取物及不同比例的兩種提取物混合物中丹參酮ⅡA、隱丹參酮及丹酚酸B的大鼠體外血漿及肝勻漿降解動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，0.2mg/ml的脂溶性提取物中丹參酮ⅡA及隱丹參酮在血漿中隨血漿濃度升

6、高，降解速率減??；60mg/ml的水溶性提取物中丹酚酸B在不同濃度血漿中降解速率沒有明顯變化；在肝勻漿中三個(gè)化合物均隨肝勻漿濃度上升降解速率增大。水溶性提取物與脂溶性提取物按不同比例(20：1，10：1，5：1)混合后在20％血漿及20％肝勻漿中，丹參酮ⅡA的降解速率與混合前比較明顯降低；隱丹參酮及丹酚酸B的降解速率與混合前比較，在20％血漿中略有上升，在20％肝勻漿中均顯著下降。兩種提取物混合后，在血漿和肝勻漿液中的確發(fā)生了代謝性藥物

7、的相互作用。 研究了丹參雙相載藥脂質(zhì)微球注射液的處方、工藝及制劑的理化性質(zhì)。結(jié)果顯示，丹參雙向載藥脂質(zhì)微球注射液呈現(xiàn)棕褐色，粒徑分布在200nm左右，ζ-電位在-20--40mv之間，滅菌前后外觀形態(tài)，粒徑以及電位值均無明顯變化，水溶性成份主要分布于水相當(dāng)中，脂溶性成份主要分布于油相當(dāng)中。 分別采用靜脈及口服給藥方式，對(duì)丹參脂溶性提取物、水溶性提取物及兩種提取物混合物中丹參酮ⅡA、丹酚酸B的大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究，

8、建立了血漿中丹參酮ⅡA和丹酚酸B同時(shí)測(cè)定的UPLC/MS-MS分析方法。結(jié)果表明，靜脈注射混合提取物乳劑比相應(yīng)等劑量脂溶性提取物乳劑和水溶性提取物溶液劑的丹參酮ⅡA和丹酚酸B的AUC顯著提高2～14倍，低劑量組和中劑量組提高至2倍，高劑量組分別提高至約14倍和5倍(p<0.01)；血漿清除率(CLt)顯著降低(p<0.01)，達(dá)峰濃度(C0.083h)顯著升高(p<0.01)?？诜o高劑量和中劑量的混合提取物混懸液比相應(yīng)等劑量脂溶性提取