小兒牛黃清心散對幼鼠驚厥發(fā)作及驚厥性腦損傷作用的研究.pdf

1、第一部分小兒牛黃清心散預(yù)防大鼠驚厥發(fā)作的療效及可能機(jī)制研究
　　目的:觀察小兒牛黃清心散(CNQP)對幼年大鼠驚厥發(fā)作的預(yù)防效果，探索其對驚厥幼鼠大腦皮層及海馬Glu、GABA及神經(jīng)元放電的影響。
　　方法:(1)120只21日齡的SD鼠隨機(jī)分為在體研究組和腦片觀察組，比較CNQP對幼鼠驚厥發(fā)作的影響:1）在體研究組分為正常對照組、驚厥對照組、L-CNQP、M-CNQP、H-CNQP干預(yù)組、安定干預(yù)組6個(gè)亞組。除正常對照組外

2、，余各組按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分別給予生理鹽水4ml/d、CNQP0.3g/kg/d，8g/kg/d，16g/kg/d、安定5.264mg/kg/d灌胃，早晚2次灌胃，給藥1天。在第二次給藥結(jié)束后30min，除正常對照組外，各組試驗(yàn)動(dòng)物均腹腔注射PTZ(70mg/kg)。比較各組動(dòng)物驚厥發(fā)作的潛伏期、發(fā)作程度、持續(xù)時(shí)間，動(dòng)物死亡率，同步腦電圖變化。2）組織水平研究的動(dòng)物仍按上述在體研究分組和給予相應(yīng)處理，于第二次給藥結(jié)束后30min，制作急性腦片

3、，記錄在無鎂人工腦脊液中各組腦片皮層和海馬場電位放電波出現(xiàn)的潛伏期、頻率及幅度。
　　(2)將200只21日齡SD鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為正常對照組、驚厥對照組、L-CNQP、M-CNQP、H-CNQP干預(yù)組。按前述方法予相應(yīng)處理，在造模后30min及3h時(shí)間點(diǎn)，用高效液相色譜法檢測各組大鼠皮層及海馬中Glu、GABA的含量，同時(shí)用膜片鉗記錄相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)皮層、海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的自發(fā)性EPSC和IPSC的情況。
　　結(jié)果:(1

4、) M-CNQP、H-CNQP干預(yù)可明顯延長戊四唑誘導(dǎo)大鼠驚厥的潛伏期，縮短驚厥發(fā)作持續(xù)時(shí)間，降低動(dòng)物死亡率(p＜0.01)，同時(shí)，抑制腦電圖異常放電，(2)M-CNQP、H-CNQP干預(yù)可明顯降低無鎂誘導(dǎo)腦片皮層和海馬CA1區(qū)的場電位放電波發(fā)作率，延長潛伏期，降低場電位的頻率及波幅。(3)CNQP可降低驚厥幼鼠腦組織中皮層及海馬谷氨酸含量及其介導(dǎo)的EPSC，同時(shí)升高驚厥幼鼠腦組織中皮層及海馬γ-氨基丁酸的含量及其介導(dǎo)的IPSC;此作用

5、呈劑量依賴性。
　　結(jié)論:CNQP能預(yù)防幼年大鼠驚厥的發(fā)生，并呈劑量依賴性;CNQP預(yù)防幼年大鼠驚厥發(fā)作的作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)大腦皮層及海馬中Glu、GABA的表達(dá)及其介導(dǎo)的自發(fā)性EPSC和IPSC的平衡有關(guān)。
　　第二部分小兒牛黃清心散對幼年大鼠驚厥性腦損傷的作用研究
　　目的:研究小兒牛黃清心散(CNQP)對幼鼠驚厥性腦損傷的作用。
　　方法:將260只21日齡SD鼠只按隨機(jī)數(shù)字表法分為5組:正常對照組、驚厥對

6、照組、L-CNQP、M-CNQP、H-CNQP干預(yù)組。除正常對照組外，各組分別給予生理鹽4ml/d、CNQP0.3g/kg/d、8g/kg/d、16g/kg/d，分早晚2次灌胃，給藥1d后，給予戊四唑（70mg/kg）腹腔注射，在PTZ注射后4h，12h，24h，48h，72h，7d時(shí)間點(diǎn)，取腦組織標(biāo)本行尼氏染色、采用TUNEL染色法檢測大腦皮層和海馬神經(jīng)元的凋亡指數(shù)、免疫組化檢測IL-1β和膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)在腦組織中的表達(dá)。