抑制PI3Kγ表達(dá)對(duì)脂多糖誘導(dǎo)膿毒癥心肌功能障礙小鼠的影響.pdf

1、目的：
　　探討抑制磷脂酰肌醇3-激酶-γ（phosphatidylinositol-3-kinase-γ，PI3K-γ）對(duì)脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的小鼠心功能障礙、心肌損傷的影響。
　　方法：
　　雄性C57bl/6小鼠100只，隨機(jī)分為5組:空白對(duì)照組(Con)、LPS組(LPS)、PI3Kγ抑制劑(AS605240)處理組(LPS+AS605240)、PI3K抑制劑(LY2940

2、02)處理組(LPS+LY294002)、DMSO處理組(LPS+DMSO)，N=20/組。腹腔注射LPS10 mg/kg制備膿毒癥模型，Con組給予相同劑量PBS。注射LPS60min前，分別給予AS組腹腔注射AS60524010 mg/kg; LY組LY29400210 mg/kg; Con組和LPS組等量生理鹽水;DMSO組給予等量DMSO。分別于給藥后6、12、24h進(jìn)行觀察，心臟超聲評(píng)估小鼠心功能變化，ELISA法檢測(cè)小鼠血清

3、中cTnⅠ、HFABP、IL-6和TNF-α含量的變化，取心肌做組織病理學(xué)檢查，RT-PCR檢測(cè)各組akt、 PI3Kγ、nf-kb、IL-6、TNF-α的mRNA表達(dá)情況;Western-Blot檢測(cè)akt、p-akt、PI3Kγ蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況
　　Con組小鼠呈現(xiàn)正常小鼠的一般特征。LPS組小鼠腹腔注射LPS6h后開(kāi)始出現(xiàn)活動(dòng)減少、精神狀況萎靡、進(jìn)食減少、眼部膿性分泌物增多、毛發(fā)呈現(xiàn)直立、

4、無(wú)光澤等癥狀，24h時(shí)間點(diǎn)癥狀明顯。LPS+AS組表現(xiàn)介于前兩者之間。LPS+LY組癥狀較LPS組更加明顯，LPS+DMSO組與LPS組表現(xiàn)無(wú)顯著差異。
　　2.病理改變
　　光鏡觀察:Con組心肌組織與正常心肌組織無(wú)明顯差異。LPS處理組可見(jiàn)心肌細(xì)胞充血、水腫，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，灶性的心肌纖維斷裂;LPS+AS組可見(jiàn)上述改變明顯較輕。LPS+LY組、LPS+DMSO組與LPS組表現(xiàn)無(wú)顯著差異。
　　電鏡觀察:Con組心肌組

5、織大量整齊排列的線粒體、光滑完整的線粒體內(nèi)嵴。LPS組線粒體明顯增多、腫脹、排列紊亂，部分線粒體嵴斷裂、溶解，細(xì)胞核腫脹、間隙增寬，部分肌絲溶解。LPS+AS組局部可見(jiàn)少量腫脹、空泡化的線粒體，心肌細(xì)胞的核周間隙不擴(kuò)大。LPS+LY組、LPS+DMSO組電鏡圖片與LPS組無(wú)顯著差異。
　　3.心臟超聲
　　取24小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察，Con組心臟超聲未見(jiàn)明顯異常。LPS組可見(jiàn)心功能較Con組下降，AS組較LPS組有所改善;L

6、Y組、DMSO組與LPS組相比，無(wú)顯著性差異。
　　4.蛋白變化
　　LPS組p-akt蛋白表達(dá)量較Con組明顯降低(P＜0.05); AS組較LPS組有所增加(P＜0.05); DMSO組與LPS組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。各組總akt蛋白無(wú)顯著性差異。同時(shí)LPS組PI3Kγ的表達(dá)較Con組明顯升高(P＜0.05); AS505240組較LPS組有所降低(P＜0.05); LY294002組、DMSO組與LP

7、S組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　5.心肌損傷標(biāo)志物cTnⅠ、HFABP改變
　　LPS組cTnⅠ、HFABP均較Con組明顯升高，且12小時(shí)達(dá)到高峰。AS組較LPS組有所增加(P＜0.05); DMSO組與LPS組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　6.炎癥因子IL-6、TNF-α改變
　　LPS組IL-6、TNF-α均較Con組明顯升高，且12小時(shí)達(dá)到高峰。AS組較LPS組有所增加(