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文檔簡介
1、目的:
1、研究甘草酸單銨鹽(Monoammonium glycyrrhizinate)對小鼠急性肺損傷的保護作用。
2、研究甘草酸單銨鹽(Monoammonium glycyrrhizinate)對小鼠急性肺損傷NF-κB信號通路的影響。
方法:
1、建立小鼠急性肺損傷模型。將BALB/c小鼠40只隨機分為5組,每組8只,分為A:正常對照組;B:急性肺損傷組;C:急性肺損傷+低劑量甘草酸單銨鹽(
2、3mg/kg)組;D:急性肺損傷+中劑量甘草酸單銨鹽(10mg/kg)組;E:急性肺損傷+高劑量甘草酸單銨鹽(30mg/kg)組。向BALB/c小鼠氣管內(nèi)注射脂多糖(5mg/kg)建立急性肺損傷模型,24h后過量麻醉處死小鼠并收集標本。
2、HE染色觀察肺組織病理改變。
3、稱量肺濕重,干重,計算肺濕重/干重比值反應(yīng)肺水腫。
4、BCA法測各組支氣管肺泡灌洗液中蛋白含量。
5、改良紐鮑爾計數(shù)板計數(shù)
3、BALF中總白細胞數(shù)量,并用Wright-Giemsa染色計數(shù)中性粒細胞。
6、ELISA法測各組BALF中IL-1β,TNF-α含量。
7、WB檢測肺組織中NF-κ B p65,Iκ B-α的表達。
結(jié)果:
1、病理結(jié)果:LPS組小鼠HE染色顯示肺組織大量炎癥細胞浸潤、明顯肺泡壁增厚、肺泡出血,而甘草酸單銨鹽治療組可減少肺部炎癥細胞浸潤、減輕肺泡壁增厚、肺泡出血。
2、肺濕重/干重比值
4、和BALF中蛋白含量:LPS組肺濕重/干重比值和BALF中蛋白含量均高于正常對照組(P<0.01),甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可明顯降低肺濕重/干重比值和BALF中蛋白含量(P<0.05或P<0.01)。
3、BALF中總白細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù):LPS組BALF中總白細胞數(shù),中性粒細胞數(shù)均高于正常對照組(P<0.01),甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可顯著降低BALF中總白細胞數(shù),中性粒細胞數(shù)(P<0.01)。
4、
5、炎癥因子IL-1β、TNF-α:LPS組BALF中IL-1β、TNF-α含量均高于正常對照組(P<0.01),甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可顯著降低BALF中IL-1β、TNF-α含量(P<0.01)。
3、蛋白免疫印跡法:LPS組較正常對照組NF-κ B p65表達明顯增高,Iκ B-α明顯降低(P<0.01)。甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組使得NF-κ B p65表達降低,Iκ B-α表達增加(P<0.05或P<0.01)。
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