甘草酸單銨鹽通過調(diào)節(jié)NF-κB通路保護小鼠急性肺損傷.pdf

1、目的：
　　1、研究甘草酸單銨鹽(Monoammonium glycyrrhizinate)對小鼠急性肺損傷的保護作用。
　　2、研究甘草酸單銨鹽(Monoammonium glycyrrhizinate)對小鼠急性肺損傷NF-κB信號通路的影響。
　　方法：
　　1、建立小鼠急性肺損傷模型。將BALB/c小鼠40只隨機分為5組，每組8只，分為A:正常對照組;B:急性肺損傷組;C:急性肺損傷+低劑量甘草酸單銨鹽(

2、3mg/kg)組;D:急性肺損傷+中劑量甘草酸單銨鹽(10mg/kg)組;E:急性肺損傷+高劑量甘草酸單銨鹽(30mg/kg)組。向BALB/c小鼠氣管內(nèi)注射脂多糖(5mg/kg)建立急性肺損傷模型，24h后過量麻醉處死小鼠并收集標本。
　　2、HE染色觀察肺組織病理改變。
　　3、稱量肺濕重，干重，計算肺濕重/干重比值反應(yīng)肺水腫。
　　4、BCA法測各組支氣管肺泡灌洗液中蛋白含量。
　　5、改良紐鮑爾計數(shù)板計數(shù)

3、BALF中總白細胞數(shù)量，并用Wright-Giemsa染色計數(shù)中性粒細胞。
　　6、ELISA法測各組BALF中IL-1β，TNF-α含量。
　　7、WB檢測肺組織中NF-κ B p65，Iκ B-α的表達。
　　結(jié)果：
　　1、病理結(jié)果:LPS組小鼠HE染色顯示肺組織大量炎癥細胞浸潤、明顯肺泡壁增厚、肺泡出血，而甘草酸單銨鹽治療組可減少肺部炎癥細胞浸潤、減輕肺泡壁增厚、肺泡出血。
　　2、肺濕重/干重比值

4、和BALF中蛋白含量:LPS組肺濕重/干重比值和BALF中蛋白含量均高于正常對照組(P＜0.01)，甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可明顯降低肺濕重/干重比值和BALF中蛋白含量（P＜0.05或P＜0.01）。
　　3、BALF中總白細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù):LPS組BALF中總白細胞數(shù)，中性粒細胞數(shù)均高于正常對照組(P＜0.01)，甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可顯著降低BALF中總白細胞數(shù)，中性粒細胞數(shù)(P＜0.01)。
　　4、

5、炎癥因子IL-1β、TNF-α:LPS組BALF中IL-1β、TNF-α含量均高于正常對照組(P＜0.01)，甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組可顯著降低BALF中IL-1β、TNF-α含量(P＜0.01)。
　　3、蛋白免疫印跡法:LPS組較正常對照組NF-κ B p65表達明顯增高，Iκ B-α明顯降低(P＜0.01)。甘草酸單銨鹽中、高劑量治療組使得NF-κ B p65表達降低，Iκ B-α表達增加(P＜0.05或P＜0.01)。