Nobiliside A凍干脂質(zhì)體的研究.pdf

1、海參皂苷nobiliside A，是第二軍醫(yī)大學(xué)海洋藥物中心從黑乳海參中自主研究發(fā)現(xiàn)的新型的三萜皂苷類化合物。經(jīng)體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)小鼠移植瘤藥效實(shí)驗(yàn)以及體外新生血管生成抑制實(shí)驗(yàn)，初步顯示該化合物具有腫瘤殺傷兼新生血管生成抑制的雙重作用，是一種新類型的抗腫瘤新藥。但nobiliside A靜脈注射具有強(qiáng)烈的溶血作用，對(duì)心臟、腎臟具有很強(qiáng)的刺激作用，普通的靜脈注射劑無(wú)法直接應(yīng)用于臨床；若口服，在胃腸道內(nèi)易被水解和酶解，生物利用度極低；

2、其它給藥途徑如肌注等又同樣存在刺激性等問(wèn)題，而且難以通過(guò)制劑學(xué)手段靶向于腫瘤器官或細(xì)胞。 因此，通過(guò)制劑學(xué)的手段將nobiliside A制成既能保持靜脈給藥途徑，又能解決其溶血性；在保證療效的前提下降低毒副作用和刺激性是本課題的主要目的。本文考慮研制該藥的脂質(zhì)體制劑，考慮到海參皂苷nobiliside A的性質(zhì)和實(shí)際的需要，采用薄膜分散法和逆相蒸發(fā)法制備了較高包封率的海參皂苷nobiliside A脂質(zhì)體。在進(jìn)行單因素考察之后

3、，本文還進(jìn)行了正交試驗(yàn)對(duì)處方進(jìn)行了優(yōu)化。最終選擇薄膜分散法，較優(yōu)處方為nobiliside A的濃度為0.5mg/ml，磷脂和膽固醇的比例為2：1．(W/W)；脂藥比定為40：1(W/W)，制備脂質(zhì)體混懸液產(chǎn)品包封率可達(dá)90％以上。 采用微柱離心法分離nobiliside A凍干前后的脂質(zhì)體中游離藥物和包裹nobilisideA的脂質(zhì)體，對(duì)包裹在脂質(zhì)體中的nobiliside A進(jìn)行了測(cè)定并計(jì)算包封率。 為了解決脂質(zhì)體的

4、穩(wěn)定性問(wèn)題，采用冷凍干燥技術(shù)制備了凍干脂質(zhì)體。其主要的優(yōu)點(diǎn)是由于以固體形式保存穩(wěn)定性得到了很大的提高。使用時(shí)只需通過(guò)簡(jiǎn)單水化，凍干脂質(zhì)體即可很容易和很快地被重建形成脂質(zhì)體混懸液而性質(zhì)差別不大，提高了長(zhǎng)期穩(wěn)定性。 然而，冷凍干燥過(guò)程中亦可以引起脂質(zhì)體嚴(yán)重的、不可逆的損傷，包括粒徑的增加、膜的破裂、脂質(zhì)體的滲漏中藥物的滲漏等。所以研究冷凍干燥過(guò)程和凍干保護(hù)劑處方是十分重要的。通過(guò)篩選不同的凍干保護(hù)劑及比例，得到以蔗糖(蔗糖：磷脂=5

5、：1)作為凍干過(guò)程中的凍干保護(hù)劑。對(duì)凍干前后脂質(zhì)體的理化性質(zhì)進(jìn)行了考察，包括粒徑分布、包封率、含量等，表明凍干后脂質(zhì)體能基本保持原來(lái)的性質(zhì)。穩(wěn)定性結(jié)果表明，凍干態(tài)脂質(zhì)體能明顯提高制劑的穩(wěn)定性。 影響因素試驗(yàn)表明nobiliside A凍干脂質(zhì)體在高溫、高濕的條件下均穩(wěn)定，在光照的條件下相對(duì)穩(wěn)定。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明nobiliside A凍干脂質(zhì)體在溫度為25℃±2℃，相對(duì)濕度為60％±10％的條件下放置3個(gè)月較為穩(wěn)定。長(zhǎng)期穩(wěn)

6、定性試驗(yàn)結(jié)果表明nobiliside A凍干脂質(zhì)體在在6℃±2℃條件下放置保存3個(gè)月較為穩(wěn)定。外觀、含量、包封率、粒徑、pH值等重要指標(biāo)未發(fā)生明顯變化。 建立了大鼠血漿中Nobiliside A含量測(cè)定的LC/MS/MS方法。探討了脂質(zhì)體與藥物溶液在體內(nèi)行為的區(qū)別，進(jìn)行了nobiliside A溶液組和脂質(zhì)體組在體內(nèi)的血漿藥物動(dòng)力學(xué)研究，結(jié)果兩種制劑靜脈注射后AUC以及各藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差別，相對(duì)于nobilisid