多西他賽脂質體凍干制劑的制備與藥代動力學研究.pdf

1、多西他賽是一種半合成紫杉類化合物，是一類新型的細胞毒性藥物，對分裂期細胞有獨特的作用，能夠通過多種機制阻止細胞有絲分裂。多西他賽具有很強的抗腫瘤作用。由于多西他賽水溶性極差，現(xiàn)多用吐溫80與13％乙醇制成注射液用于臨床，但多出現(xiàn)過敏反應、體液潴留等嚴重的毒性反應。這些毒性反應的出現(xiàn)很大部分是由制劑中的吐溫80導致的。為此，研究新型高效低毒的多西他賽新劑型成為近年藥劑學研究的熱點。脂質體是一種新型藥物載體，可分別將水溶性或脂溶性的藥物包封

2、在脂質體的水層或脂膜內，被廣泛用作抗癌藥物載體。 本文目的在于制備多西他賽脂質體(Docetaxelliposome，L-DOC)，以期提高多西他賽的溶解性，改善體內藥代動力學過程，避免吐溫80等助溶劑導致的毒性反應，有利于增強抗腫瘤作用，為多西他賽脂質體臨床前研究奠定基礎。 目的：1.研制包封率高、含藥量高的L-DOC新劑型。2.建立L-DOC的質量控制方法，用于脂質體中多西他賽的含量測定。3.研究磷脂-膽固醇比例、脂

3、質-藥物比例、水化溫度等影響因素，以優(yōu)化L-DOC的處方和工藝。4.考察L-DOC凍干制劑在不同條件下的穩(wěn)定性，為進一步研究貯存條件及其選擇提供參考。5.對單次靜脈給予L-DOC凍干制劑和市售多西他賽注射(Marketdocetaxel，M-DOC)后的大鼠體內藥動參數(shù)進行研究。6.通過以上研究為下一步實驗提供理論基礎。 方法：1.采用旋轉蒸發(fā)法制備L-DOC，結合冷凍干燥技術獲得包封率高、粒徑均勻的凍干脂質體。2.HPLC檢測

4、脂質體中多西他賽的含量，采用超高速離心法測定脂質體的包封率。3.采用激光粒度儀測定L-DOC的粒徑和多分散指數(shù)。4.通過單因素分析和均勻設計考察磷脂-膽固醇比例、脂質-藥物比例、緩沖體系pH值、水化溫度等幾個重要因素，優(yōu)化L-DOC的處方工藝。5.通過4℃留樣觀察和恒溫加速實驗，考察L-DOC的穩(wěn)定性。6.血漿中多西他賽HPLC檢測方法的建立及其血藥濃度檢測，用3P97藥代動力學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。 結果：1.優(yōu)化前處方制備

5、的L-DOC平均含量為標示含量的100.87％，平均包封率為92.40％，平均粒徑約為214.9nm。2.建立了HPLC測定脂質體中多西他賽含量的方法。該方法在3.64～7.80μg/ml濃度范圍內線性良好，r=0.9996，回收率高達99.18％，日內RSD＜2.0％，日間RSD＜2.5％，方法穩(wěn)定性好、重復性高。3.研究結果顯示，磷脂/膽固醇4:1；藥物/脂質1:50；藥物/無水乙醇1:10；緩沖液pH。值5為最優(yōu)處方。脂質干膜在水

6、化溫度40℃條件下，水化60min，然后進入MFIC反應腔，壓力為35KPa。優(yōu)化處方制得的L-DOC含量為標示含量的(99.96±1.87)％，包封率(91.61±1.69)％，粒徑(231.6±100.3)nm，PI(0.35±0.06)。4.L-DOC凍干制劑初步穩(wěn)定性考察認為，將脂質體凍干制劑于4℃貯存，可以大大提高其穩(wěn)定性，30d內各考察指標無明顯變化。5.大鼠體內藥代動力學研究結果顯示，L-DOC較M-DOC具有更高的血藥濃

7、度、更長的生物半衰期和更大的血藥濃度一時間曲線下面積。 結論： 1.建立了穩(wěn)定性好、重復性高，線性關系良好的HPLC分析方法。 2.建立了超高速離心法測定多西他賽脂質體包封率的方法。 3.建立了PCS分析脂質體粒徑分布的方法。 4.優(yōu)化處方制備的L-DOC包封率、粒徑、PI結果令人滿意。 5.L-DOC凍干制劑在低溫條件下穩(wěn)定性較好。 6.藥動學研究表明，與M-DOC比較，L-DO