補(bǔ)腎健脾活血法防治骨質(zhì)疏松癥的分子機(jī)制研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)旨在研究補(bǔ)腎健脾活血法（固本活血壯骨顆粒）對(duì)SD大鼠乳鼠成骨細(xì)胞骨保護(hù)素（OPG）和破骨細(xì)胞分化因子（RANKL）的基因表達(dá)的影響，以及補(bǔ)腎健脾活血法（固本活血壯骨顆粒）對(duì)成骨細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響，并與鐵劑作出對(duì)照，從而說明補(bǔ)腎健脾活血法對(duì)骨質(zhì)疏松癥具有較為良好的防治作用。
　　方法：采用改良的胰蛋白酶和I型膠原酶聯(lián)合的二次酶消化法對(duì)SD大鼠乳鼠成骨細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)、擴(kuò)增，成骨細(xì)胞純化用差速貼壁法進(jìn)行；制備固本活血壯

2、骨顆粒（大、中、小劑量）含藥血清、仙靈骨葆含藥血清、戊酸雌二醇含藥血清以及對(duì)照組（生理鹽水組）含藥血清，含藥血清干預(yù)成骨細(xì)胞后提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄，進(jìn)行RT-PCR實(shí)驗(yàn)；制備固本活血壯骨顆粒（大、中、小劑量）含藥血清，含藥血清及去鐵胺（DFO）、枸櫞酸鐵銨（FAC）干預(yù)成骨細(xì)胞，分組為：生理鹽水組、DFO、FAC、固本活血壯骨顆粒大劑量、中劑量、小劑量、大劑量+DFO、中劑量+DFO、小劑量+DFO、大劑量+FAC、中劑量+FAC、小劑

3、量+FAC組，24h后熒光染色，拍照，分析熒光強(qiáng)度。
　　結(jié)果：與生理鹽水組相比，固本活血壯骨顆粒大劑量、中劑量組骨保護(hù)素OPG mRNA的基因表達(dá)明顯升高，破骨細(xì)胞分化因子RANKL的基因表達(dá)降低，p＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與生理鹽水組相比，固本活血壯骨顆粒大劑量、中劑量組可明顯升高成骨細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，綠色熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，p＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：補(bǔ)腎健脾活血法（固本活血壯骨顆粒）能增強(qiáng)成骨細(xì)胞增殖，抑