抵抗素樣分子β在動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性中的作用.pdf

1、目的：目前研究顯示，急性心血管事件的主要病因是動脈粥樣硬化易損斑塊的形成及其繼發(fā)病變。易損斑塊亦稱不穩(wěn)定斑塊，主要的病理學(xué)特點包括大量炎性細胞浸潤、較薄的纖維帽和較大的脂質(zhì)核心。其中炎癥機制貫穿于動脈粥樣硬化病變的發(fā)生、發(fā)展及惡化的整個過程，在易損斑塊的形成與進展中發(fā)揮重要作用。斑塊內(nèi)大量炎癥細胞聚集，多種細胞因子和酶激活，加速斑塊不穩(wěn)定性的進展，最終破裂。抵抗素樣分子β（Resistin-like moleculeβ，RELMβ）是一

2、種抵抗素相關(guān)蛋白，既往認為局限表達于胃腸道細胞。近年研究發(fā)現(xiàn)，其在心、肺及腎等多種器官的巨噬細胞、T細胞和平滑肌細胞(smooth musclecell，SMC)中有表達，能夠促進局部炎癥反應(yīng)。但目前RELMβ在動脈粥樣硬化易損斑塊中是否發(fā)揮確切作用尚不十分明確。本實驗旨在抵抗素樣分子β(RELMβ)在動脈粥樣硬化易損斑塊模型中的作用。
　　方法：
　　采用常用的ApoE-/-小鼠，制作頸動脈斑塊模型。雄性ApoE-/-小鼠

3、先行普通飲食喂養(yǎng)2周。后給予高脂飲食（飼料主成分0.25％膽固醇+15％脂肪）喂養(yǎng)2周。隨后小鼠戊巴比妥充分麻醉，消毒，作頸部正中切口，充分暴露右側(cè)頸總動脈。用長3mm、內(nèi)徑0.3mm硅膠套管套置于頸總動脈外周，固定套管，縫合切口。繼續(xù)高脂飲食喂養(yǎng)8周后，行頸總動脈局部慢病毒轉(zhuǎn)染。根據(jù)轉(zhuǎn)染慢病毒的不同，隨機分為正常對照組、si-NC組和si-RELMβ組，每組20只。RELMβ干擾序列:5'-GGAGAGTGAATCTGCTCTTAG-

4、3'。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)。4周后，小鼠腹腔注射麻醉劑安樂死，收集血液及頸總動脈標(biāo)本。檢測血清中血脂含量。本實驗采用蛋白印跡(Western blot)法檢測斑塊內(nèi)RELMβ蛋白表達含量。采用天狼猩紅染色檢測斑塊內(nèi)膠原含量，油紅O染色檢測脂質(zhì)含量。采用免疫組化染色法檢測斑塊內(nèi)平滑肌細胞、巨噬細胞、白介素-1β（IL-1β）和白介素-6(IL-6)的含量。
　　結(jié)果：
　　3組小鼠體質(zhì)量及血脂水平無明顯差異。si-RELMβ組RELM