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文檔簡介
1、目的:
研究頸動脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊在酸性條件下與膽汁發(fā)生的軟化溶解反應(yīng),分析測定反應(yīng)前后斑塊成分的改變。
方法:
第一部分,驗證頸動脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊與膽汁在酸性條件下發(fā)生的溶解現(xiàn)象:通過頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)收集頸動脈粥樣硬化斑塊,根據(jù)斑塊的成分將其分為不穩(wěn)定性斑塊與穩(wěn)定性斑塊兩類,并將每類斑塊分成3組,在25℃的實驗條件下,分別加入膽汁(PH≈7),稀鹽酸(PH=2),酸化后的膽汁(PH=2),觀察并
2、記錄各組斑塊的溶解情況。
第二部分,使用氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜的方法研究反應(yīng)前后斑塊成分的改變:分別將反應(yīng)前不穩(wěn)定性斑塊的脂質(zhì)壞死核心和反應(yīng)后生成的墨綠色絮狀物質(zhì)進行成分測定,對比分析二者之間成分的差異。
第三部分,使用考馬斯亮藍法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)測定反應(yīng)前后斑塊中蛋白質(zhì)成分的改變:分別將反應(yīng)前后的樣本進行蛋白提取、濃度測定、酶解后行質(zhì)譜檢測,對比反應(yīng)前后樣本中蛋白質(zhì)成分的改變。
結(jié)果:
1.只有酸化后的
3、膽汁(PH=2)可以與頸動脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊發(fā)生明顯的溶解反應(yīng),稀鹽酸(PH=2)和普通膽汁(PH=7)與頸動脈粥樣硬化不穩(wěn)定性及穩(wěn)定性斑塊均無明顯反應(yīng)。
2.頸動脈粥樣硬化斑塊的分類中,只有不穩(wěn)定性斑塊能夠與酸化后的膽汁發(fā)生明顯的溶解反應(yīng)。
3.不穩(wěn)定性斑塊與酸化后的膽汁發(fā)生的溶解反應(yīng)中,可見不穩(wěn)定性斑塊的脂質(zhì)壞死核心在酸化后的膽汁作用下迅速軟化溶解,最終轉(zhuǎn)化成為一種墨綠色絮狀物質(zhì)。
4.氣相色譜聯(lián)合
4、質(zhì)譜法可測得反應(yīng)前后樣本中糖、酸、醇、酯等較小分子量物質(zhì)成分的變化。最終測得反應(yīng)前的脂質(zhì)壞死核心中有小分子物質(zhì)11種,反應(yīng)后生成的絮狀物質(zhì)中則有50種,對比發(fā)現(xiàn)消失了5種,新生成了44種。
5.考馬斯亮藍法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)可測得反應(yīng)前后樣本中大分子蛋白成分的改變。最后測得反應(yīng)前的脂質(zhì)壞死核心中有蛋白416種,反應(yīng)后的生成物中則有191種,對比發(fā)現(xiàn)消失了285種,新生成了60種。
結(jié)論:
1.頸動脈粥樣硬化不穩(wěn)
5、定性斑塊與酸性條件下的膽汁(PH=2)發(fā)生的溶解現(xiàn)象,實質(zhì)是斑塊中的脂質(zhì)壞死核心與酸化后的膽汁反應(yīng),最終軟化溶解成為一種墨綠色絮狀物質(zhì)。
2.脂質(zhì)壞死核心體積占比較大的不穩(wěn)定性斑塊在酸化后的膽汁中溶解效果顯著,此現(xiàn)象有望為不穩(wěn)定性斑塊的血管介入治療提供新方法。
3.氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜法可用于脂質(zhì)壞死核心和反應(yīng)后生成的墨綠色絮狀物質(zhì)中糖、酸、醇、酯等較小分子物質(zhì)的對比測定。
4.考馬斯亮藍法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)可適用
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