姜黃素提取及其修飾產(chǎn)物的活性研究.pdf

1、姜黃素是一種從植物中提取的天然藥物，其多種藥理作用已被公認(rèn)，目前已被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域?？拱┓矫娴幕钚匝芯勘砻?，姜黃素不但具有預(yù)防腫瘤的作用，同時還能夠治療腫瘤。此外，對動脈粥樣硬化、肝纖維化和急性肺損傷等疾病也有良好的藥效。目前姜黃素的提取方法主要有酸堿水提取法、有機(jī)溶劑提取法、酶法等，其操作過程對姜黃素結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一定程度破壞或較為繁瑣，對結(jié)果數(shù)據(jù)的簡單處理也不利于對姜黃素單體的準(zhǔn)確分析，此外，姜黃素自身存在結(jié)構(gòu)上的缺陷，其水溶性差

2、，生物利用度不高，且體內(nèi)半衰期短，這對于姜黃素的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用是不利的。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用不同濃度的乙醇和水浸提姜黃素，然后過濾、濃縮，用快速吸附柱層析分離粗提物得到姜黃素單體。以姜黃素為先導(dǎo)化合物，選用單糖類和維生素類化合物對其兩端的酚羥基進(jìn)行酯化處理。通過觀察姜黃素及其修飾產(chǎn)物在作用于腫瘤細(xì)胞24小時前后的形態(tài)變化以及MTT法所得OD值計(jì)算出的抑制率來分析腫瘤細(xì)胞受其作用的凋亡情況，并且根據(jù)數(shù)據(jù)驗(yàn)證修飾產(chǎn)物在腫瘤細(xì)胞受體引導(dǎo)的

3、在細(xì)胞凋亡過程起促進(jìn)作用的機(jī)制。
　　 (1)通過5種不同濃度的乙醇提取姜黃中姜黃素，HPLC驗(yàn)證檢測80％乙醇濃度條件下得率最高為31.6％，快速柱層析分離得到姜黃素單體純度較高，得到的姜黃素為橙黃色結(jié)晶粉末。
　　 (2)選用兩種單糖(葡萄糖、D-阿拉伯糖)與一種維生素(煙酸)對姜黃素進(jìn)行修飾，獲得了3種姜黃素衍生物。在制備過程中利用姜黃素苯環(huán)上含有極易吸電子的取代基以及羥基的鄰位效應(yīng)促進(jìn)活化處理的修飾物與姜黃素發(fā)生

4、酯化反應(yīng)。經(jīng)紅外、紫外和核磁共振檢測在姜黃素苯環(huán)酚羥基處形成酯基基團(tuán)，目標(biāo)產(chǎn)物得率較高均在30％左右。紅外圖譜中C=O(1850～1600cm-1)碳氧雙鍵的特征峰較標(biāo)準(zhǔn)品的吸收強(qiáng)度從不同程度上變大。紫外可見吸收的官能團(tuán)即生色團(tuán)含量提升導(dǎo)致產(chǎn)物發(fā)生明顯藍(lán)移。δ5.22(2H，d，J=7.6H，Glca-1，Glcb-1)，4.41(1H，d，J=5.8Hz，2×Ara-1)等特征峰數(shù)據(jù)說明實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)化合物的制備。
　　 (3)將

5、姜黃素與葡萄糖、D-阿拉伯糖和煙酸3種化合物連接后，將產(chǎn)物加入HeLa和HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液中，發(fā)現(xiàn)在不同濃度下均對這2種腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抑制，其中葡萄糖修飾姜黃素的產(chǎn)物和煙酸修飾的產(chǎn)物效果較強(qiáng)，這與文獻(xiàn)報道的HeLa和HepG2細(xì)胞凋亡機(jī)制有關(guān)，煙酸受體在介導(dǎo)細(xì)胞過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ的)激活能抑制癌細(xì)胞生長，葡萄糖受體在腫瘤細(xì)胞表面可以介導(dǎo)葡萄糖偶聯(lián)體的識別。這些對于提高姜黃素在自身活性基團(tuán)不被破壞的前提下作用于腫瘤細(xì)