消癌平對伊馬替尼在大鼠體內外代謝的影響.pdf

1、目的:建立UPLC-MS/MS方法檢測大鼠血漿伊馬替尼及其活性代謝產(chǎn)物N-去甲基伊馬替尼的濃度。研究消癌平注射液對伊馬替尼在大鼠體內外代謝的影響。
　　方法:
　　(1)用乙腈溶劑沉淀血漿蛋白的前處理方法，運用三重四級桿液質聯(lián)用儀，色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18 Column(1.7-μm，2.1×50mm):流動相為乙腈-水（含0.1％甲酸），梯度洗脫，流速為0.4 mL/min，柱溫40℃，以卡馬西平為

2、內標。
　　(2)以人肝鼠肝微粒體建立伊馬替尼體外孵育體系，在體系中加入不同濃度的消癌平:分別在200μL的伊馬替尼孵育體系中加入2μL的消癌平注射液原液和消癌平注射液10倍稀釋液，于37℃水浴振蕩器中孵育30min，孵育結束后立即置于-80℃冰箱中冷卻至-80℃終止反應，樣品經(jīng)處理后2μL進樣經(jīng)UPLC-MS/MS儀器檢測代謝產(chǎn)物N-去甲基伊馬替尼的生成量。
　　(3)將16只雄性健康SD大鼠隨機分成2組，每組8只，分別為

3、:對照組（A組）和7.5mL/kg消癌平注射液腹腔注射長期給藥組（B組）。長期給藥組（B組）于每天早上八點腹腔注射給予相應劑量的消癌平注射液，連續(xù)給藥10天。第10天早上B組給予消癌平注射液30min后，2組大鼠（已禁食12小時）單次灌胃給予30mg/kg伊馬替尼，分別于灌胃后的0.25h，0.5h，1h，2h，4h，6h，8h，12h和24h采集血樣各0.5 mL。將血樣置于4℃離心機中離心，取血漿保存在-80℃冰箱中。建立能夠測定大

4、鼠血漿中伊馬替尼及其活性代謝產(chǎn)物N-去甲基伊馬替尼血藥濃度的UPLC-MS/MS方法，應用DAS3.0系統(tǒng)對所得數(shù)據(jù)進行相應的藥動學分析，SPSS17.0系統(tǒng)進行統(tǒng)計學分析。
　　結果:
　　(1)伊馬替尼的出峰時間為0.38min，線性范圍為20～10000ng/mL(r2=0.9992)，最低定量限為20ng/mL，回收率為87.67％～92.61％，日內、日間精密度的RSD均小于15％。N-去甲基伊馬替尼的出峰時間為0

5、.36 min，線性范圍為1～1000ng/mL(r2=0.9995)，最低定量限為1ng/mL，回收率為87.26％～98.89％，日內、日間精密度的RSD均小于15％。血漿基質對本法測定大鼠血漿中伊馬替尼和N-去甲基伊馬替尼幾乎無干擾。
　　(2)以伊馬替尼為底物，抑制劑消癌平原液和消癌平10倍稀釋液在大鼠肝微粒體中，與對照組相比，分別抑制了90.83％和50.73％;抑制劑消癌平原液和消癌平10倍稀釋液在人肝微粒體中，與對照

6、組相比，分別抑制了79.44％和28.77％。
　　(3)在消癌平注射液腹腔注射長期給藥后伊馬替尼及其活性代謝產(chǎn)物N-去甲基伊馬替尼的相關藥代動力學參數(shù)發(fā)生了改變。相較于空白對照組，血漿伊馬替尼的Tmax延后了105.72％; Vz/F減少24.76％; N-去甲基伊馬替尼的AUC(0-t)減少了21.37％; AUC(0-∞)減少了19.29％; Tmax延后了35.70％; Cmax減少了20.01％; Vz/F增加了45.3