堿提松木層孔菌菌絲體多糖的結(jié)構(gòu)及活性研究.pdf

1、本論文主要通過生物發(fā)酵技術(shù)培養(yǎng)松木層孔菌（Phellinus pini），確定最優(yōu)培養(yǎng)基和搖瓶發(fā)酵條件；并用堿提的方法從菌絲體中提取多糖，經(jīng)純化得到堿提水溶性多糖PEP，并對該多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及免疫活性進行研究。
　　 首先研究了培養(yǎng)基成分及搖瓶發(fā)酵條件對松木層孔菌菌絲體生長及胞外多糖產(chǎn)量的影響。結(jié)果表明，液體發(fā)酵最適培養(yǎng)基為白砂糖4％、酵母粉0.4％、KH2PO40.3％、MgSO40.1％、VB1，VB20.01g/L；液體發(fā)

2、酵的最適培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度26℃、裝液量250mL/500mL、搖床轉(zhuǎn)速130r/min、培養(yǎng)基初始pH為6、接種量15％、培養(yǎng)時間6d。菌絲體生物量達5.27 g/L，胞外多糖產(chǎn)量達0.42g/L。
　　 松木層孔菌經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)得到菌絲體，水提后菌絲體經(jīng)0.5M NaOH室溫下提取，鹽酸中和，醇沉，常規(guī)干燥后得堿提水溶性多糖CPEP。CPEP采用凍融分級，酶和Sevage法聯(lián)合脫蛋白及SepharoseCL-6B柱層析制備等方法

3、進行純化，得水溶性多糖PEP。苯酚-硫酸法測總糖含量為92.12％。經(jīng)SepharoseCL-6B柱層析和HPLC分析，PEP為均一性多糖，分子量約為16kDa。
　　 采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及IR、GC、GC-MS等方法對PEP的結(jié)構(gòu)進行分析。綜合幾種方法的結(jié)果，推測PEP結(jié)構(gòu)的主體部分由1,2-Man組成，平均每5個殘基上有2個分支，在Man的6-O分出支點連接側(cè)鏈，1，6-Gal和1，4-Man