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1、目的:探討高糖通過(guò)誘導(dǎo)β細(xì)胞發(fā)生去分化損傷胰島β細(xì)胞功能及其可能的機(jī)制。
方法:通過(guò)不同濃度高糖干預(yù)MIN6細(xì)胞48h以及構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子7類似物2(Transcription factor7-like2,TCF7L2)慢病毒干擾載體下調(diào)TCF7L2表達(dá),采用葡萄糖刺激胰島素分泌試驗(yàn)( glucose-stimulated insulin secretion, GSIS)檢測(cè)β細(xì)胞功能;實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PC
2、R)及蛋白免疫印跡(Western blot)、免疫熒光方法檢測(cè)高糖干預(yù)后β細(xì)胞內(nèi)祖細(xì)胞標(biāo)志基因、β細(xì)胞標(biāo)志基因及TCF7L2表達(dá)變化。
結(jié)果:①不同濃度高糖干預(yù)β細(xì)胞后,當(dāng)濃度達(dá)到35mmol/L時(shí),β細(xì)胞祖細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)明顯增加。且在該濃度時(shí),檢測(cè)到MIN6細(xì)胞標(biāo)志基因表達(dá)明顯降低,MIN6細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素分泌功能減退。②高糖(35mmol/L)干預(yù)β細(xì)胞后, TCF7L2mRNA和蛋白水平表達(dá)減少。③慢病毒下調(diào)TC
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