外源性神經(jīng)節(jié)苷脂（GM—1）對神經(jīng)干細(xì)胞增殖及分化的影響.pdf

1、目的：觀察不同劑量外源性神經(jīng)節(jié)苷脂(GM-1)對新生大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響。 方法：從新生大鼠海馬組織分離出神經(jīng)干細(xì)胞，培養(yǎng)于含有EGF(20ng/mL)和bFGF(20ng/mL)神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)液中，傳代二次后進(jìn)行分組實驗。實驗共分五組：(1)對照組僅是神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液，(2)低劑量GM-1組GM-1(0.3μg/ml)+神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液，(3)高低劑量GM-1組GM-1(30μg/ml)+神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)培

2、養(yǎng)液，(4)bFGF組bFGF(20ng/mL)+神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液，(5)bFGF/GM-1組GM-1(30μg/ml)+bFGF(20ng/mL)+神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液。將神經(jīng)干細(xì)胞分別在各組培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng)并貼壁培養(yǎng)誘導(dǎo)分化。采用神經(jīng)干細(xì)胞球直接計數(shù)和繪制生長曲線的方法測定細(xì)胞的增殖能力，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對神經(jīng)干細(xì)胞分化情況進(jìn)行鑒定并經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理對各組培養(yǎng)液中形成MAP-2及GFAP的陽性細(xì)胞率加以比較。 結(jié)果：空白

3、組，低劑量GM-1組神經(jīng)干細(xì)胞生長曲線隨培養(yǎng)天數(shù)的增加而降低。高劑量GM-1組bFGF組及GM-1/bFGF組神經(jīng)干細(xì)胞生長曲線隨培養(yǎng)天數(shù)的增加而升高，形成細(xì)胞球的數(shù)量多，直徑大，尤以GM-1/bFGF組最為明顯。空白組，低劑量GM-1組及高劑量GM-1組形成MAP-2及GFAP的陽性細(xì)胞少；bFGF組，GM-1/bFGF組培養(yǎng)液中形成MAP-2及GFAP的陽性細(xì)胞較多，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理GM-1/bFGF組與bFGF組，高劑量GM-1組細(xì)胞