固定化酶：新載體，新方法.pdf

1、由于固定化酶優(yōu)異的性能，固定化酶廣泛應(yīng)用于食品，環(huán)境，分析化學(xué)，醫(yī)藥以及生物技術(shù)等許多領(lǐng)域。固定化酶具有更好的穩(wěn)定性，容易從反應(yīng)介質(zhì)中分離出來，可實現(xiàn)多次重復(fù)使用。 本研究涉及三方面的內(nèi)容：一是新型甲殼胺顆粒的制備及在固定化酶方面的應(yīng)用；二是建立一種新的固定化酶方法，即在多孔材料中捕捉交聯(lián)酶微晶；三新型膠體顆粒的制備及用于酶的固定化。 甲殼胺顆粒的制備及在固定化酶方面的應(yīng)用：以乙酸水溶液為熔劑配制甲殼胺溶液，向該溶液中加

2、入可溶性鹽類得到乳狀混合液，然后用NaOH調(diào)至堿性，即得甲殼胺顆粒。所得甲殼胺顆粒大小分布在微米級，并表現(xiàn)出多空性。為增強甲殼胺顆粒的機械強度，防止甲殼胺顆粒在酸性溶液中溶解，并提供固定化酶所需的活性反應(yīng)基團(tuán)，用雙官能團(tuán)試劑戊二醛對甲殼胺顆粒交聯(lián)處理。戊二醛處理后的甲殼胺顆粒作為載體用于固定化酪氨酸酶研究，發(fā)現(xiàn)所得的固定化酶具有高的蛋白載量(80mg/g載體)和高的酶活力(350單位/g載體)。 在多孔材料中捕捉交聯(lián)酶微晶：捕捉

3、交聯(lián)酶微晶過程分為三步：第一步是把多孔氧化硅浸入酪氨酸酶溶液，使酶溶液充滿多孔材料；第二步是使充滿酶溶液的多孔材料與沉淀劑溶液接觸，使酶分子在材料的孔道中形成晶體；第三步用戊二醛進(jìn)行處理，使孔道中的酶晶體交聯(lián)形成不溶晶體。所得固定化酶具有高的蛋白載量(420mg/g載體)和高的酶活力(超過1600單位/g載體)。固定化酶具有高的熱穩(wěn)定性，抗有機熔劑及尿素穩(wěn)定性，以及機械穩(wěn)定性。 新型膠體顆粒的制備及用于酶的固定化：在聚乙烯醇存在