優(yōu)化的砷鎘鉛混合物誘導C6膠質瘤細胞凋亡及其機制研究.pdf

1、目的:
　　膠質瘤是最常見的并且最具有侵襲性的原發(fā)性腦腫瘤，預后極差，因為藥物通過血腦屏障(BBB)還是一個需要解決的問題。膠質瘤細胞表現(xiàn)出細胞凋亡減弱，促進增殖和侵襲性。因此，誘導腦膠質瘤細胞凋亡是一種降低腦膠質瘤的侵襲性很有前途的治療策略。已經有研究證明砷、鎘、鉛對癌癥具有抗惡性細胞增生和促細胞凋亡作用。因此，假設能夠滲透血腦屏障的As+Cd+Pb可能會影響惡性膠質瘤的生存能力，并將其作為一種化學治療劑進行研究。假設As+Cd

2、+Pb混合物的作用要大于單種金屬的作用。評估了重金屬混合物對C6膠質瘤細胞株潛在的細胞凋亡的影響。并且對星形膠質細胞活化和炎癥反應變化的可能性進行了檢測，對絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)信號通道的調制進行了探討?？偟膩碚f，我們的研究識別了As+Cd+Pb混合物對惡性膠質瘤細胞活性的影響機制。
　　方法:
　　細胞培養(yǎng)和MTT試驗，DNA片段化-細胞凋亡測試，復合指數(shù)計算，免疫印跡，免疫細胞化學，統(tǒng)計分析.
　　結果:<

3、br>　　分析了As+Cd+Pb組合對大鼠C6膠質瘤細胞的影響，首先確定了單種金屬的致死濃度(LC)，然后，對C6膠質瘤細胞進行不同濃度的As+Cd+Pb處理，包括LC-5（As:5μM，Cd:2.5μM和Pb:15μM）以及兩倍或三倍LC-5濃度。As+Cd+Pb引起C6膠質瘤細胞生存能力的劑量依賴性降低。通過末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP末端標記發(fā)現(xiàn)，細胞死亡歸咎于DNA片段碎裂。半胱天冬酶-9(caspase-9)的裂解表達增

4、強，表明細胞凋亡是由線粒體介導的。隨著促凋亡蛋白Bax的增加以及抗凋亡蛋白Bcl2的減少，Bax/Bcl2比值大于1.0，證明了線粒體途徑的細胞凋亡。探索凋亡調節(jié)機制揭示了C6膠質瘤細胞形態(tài)的改變和星形膠質細胞標志物膠質纖維酸性蛋白（GFAP）的增強，表明與活化的caspase-9存在共定位。膠質細胞活化伴隨著炎癥反應，涉及白細胞介素-1（IL-1）和IL-1受體表達的上調。IL-1也會引發(fā)細胞凋亡，拮抗IL-1受體后cleaved c

5、aspase-9明顯減少。磷酸化p38的表達增加證實p38的活化和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)參與。利用p38-MAPK抑制劑SB203580能夠抑制caspase-9的活化，從而進一步證實p38-MAPK參與介導C6膠質瘤細胞凋亡。
　　結論:
　　目前的研究表明，優(yōu)化濃度的砷鎘鉛混合物(As+Cd+Pb)對C6膠質瘤細胞系是有毒性作用的。劑量依賴性細胞凋亡的增加導致C6膠質瘤細胞數(shù)目的減少。Bax/Bcl2比例上升導致