2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本研究采用EST策略并結(jié)合RACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)技術(shù),成功地從鹽生模式植物小鹽芥的幼苗葉片中克隆了一個(gè)G2H2類型的鋅指蛋白基因ThZF1。并對其表達(dá)特征,轉(zhuǎn)錄因子特性及轉(zhuǎn)基因植物中的功能進(jìn)行了初步研究。  研究結(jié)果表明,小鹽芥ThZF1cDNA編碼蛋白由276個(gè)氨基酸組成,推測其分子量為30kD,等電點(diǎn)8.27。它與擬南芥AZF2有最高的同源性,同源性達(dá)79%。推測的小鹽芥ThZF1蛋白

2、沒有跨膜區(qū),為水溶性蛋白。它包含兩個(gè)C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域,每個(gè)C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域都具有植物特有的序列QALGGH,是典型的TFⅢA型鋅指蛋白。N端的B-Box可能是其核定位(NLS)序列,另外還發(fā)現(xiàn)了L-Box,DNL-Box等結(jié)構(gòu)序列。  利用Northern雜交和RT-PCR技術(shù)分析表達(dá)差異,結(jié)果表明ThZF1受干旱和鹽的誘導(dǎo)。GFP融合瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)顯示它定位于細(xì)胞核?! hZF1有激活酵母HIS基因的作用,凝膠阻滯分析表明Th

3、ZF1能特異結(jié)合EP2元件序列。所有這些結(jié)果說明,ThZF1可能是一個(gè)EP2結(jié)合型轉(zhuǎn)錄因子,暗示它是一個(gè)潛在的植物轉(zhuǎn)錄因子。煙草瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)表明,ThZF1能誘導(dǎo)AtEPSP1:GUS的表達(dá),說明它可能直接作用于EPSPs類下游基因的啟動(dòng)子而調(diào)控后者的表達(dá)?! 榱诉M(jìn)一步研究ThZF1的功能,用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將其基因轉(zhuǎn)入擬南芥,得到轉(zhuǎn)基因的擬南芥azf2突變體互補(bǔ)植株,并研究了轉(zhuǎn)基因互補(bǔ)植株與突變體和野生對照的生長以及對鹽和干旱的耐受性

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