五味子乙素對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)擬從體外水平觀察不同濃度的五味子乙素（Sch B）對(duì)氯化鈷（CoCl2）誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞—HK-2細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用，并探討其可能機(jī)制。
　　方法：取離體培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞，隨機(jī)分為6組：對(duì)照組：細(xì)胞不加任何藥物處理；模型組：細(xì)胞于培養(yǎng)基中加入600μmol/L的CoCl2處理24 h；低劑量Sch B保護(hù)組：細(xì)胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為1μmol/L的Sch B預(yù)處理2h后，其余操作同模型組；高劑量Sch B

2、保護(hù)組：細(xì)胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為10μmol/L的Sch B預(yù)處理2h后，其余操作同模型組；低劑量Sch B組：細(xì)胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為1μmol/L的Sch B處理2h；高劑量Sch B組：細(xì)胞于培養(yǎng)基中加入終濃度為10μmol/L的Sch B處理2h。CCK-8試劑盒檢測各組細(xì)胞活性；AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率；Western Blot檢測各組細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子1，α亞基（HIF-1α）、P

3、53蛋白的表達(dá)；RT-PCR檢測各組HIF-1α和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：與對(duì)照組相比，模型組細(xì)胞活性顯著降低，細(xì)胞凋亡率顯著增加，HIF-1α蛋白表達(dá)量顯著增加，P53蛋白表達(dá)量顯著減少，HIF-1αmRNA表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，iNOS mRNA表達(dá)量顯著增加；與模型組相比，低劑量和高劑量Sch B保護(hù)組細(xì)胞活性均顯著增加，細(xì)胞凋亡率均顯著降低，HIF-1α蛋白表達(dá)量均顯著減少，P53蛋白表

4、達(dá)量均顯著增加，HIF-1αmRNA和iNOS mRNA表達(dá)量均顯著減少，且高劑量Sch B保護(hù)組均較低劑量Sch B保護(hù)組作用更顯著；與對(duì)照組相比，低劑量和高劑量Sch B組細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡率、P53蛋白表達(dá)量、iNOS mRNA表達(dá)量均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且低劑量和高劑量Sch B組幾乎不表達(dá)HIF-1α蛋白。
　　結(jié)論：1μmol/L和10μmol/L的Sch B可通過抑制HIF-1α和iNOS的表達(dá)減少HK-2細(xì)胞的凋亡，