果蠅基因ecp的生物信息學(xué)分析及其轉(zhuǎn)基因模型的建立.pdf_第1頁
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1、ecp是本實(shí)驗(yàn)室從野生黑腹果蠅(DrosophilaMelanogaster)中克隆的一個(gè)未知功能的新基因,cDNA全長(zhǎng)1572bp,含有一個(gè)1269bp的開放閱讀框,編碼422個(gè)氨基酸。生物信息學(xué)分析表明ECP在真核生物進(jìn)化過程中非常保守,一致性超過50%,這類蛋白質(zhì)N端均含有一個(gè)類似亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)域,C端含有一個(gè)eIF-5C結(jié)構(gòu)域,但與目前已知的所有翻譯起始因子相似性較低,屬于一個(gè)新的蛋白家族。用HEK293細(xì)胞和Hela細(xì)胞進(jìn)行

2、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pEGFP-ECP的定位分析顯示:ECP主要定位在胞質(zhì)中,其分布與細(xì)胞分裂無明顯關(guān)系。胚胎抗體染色結(jié)果也顯示ECP主要存在于胞漿中,原位雜交結(jié)果顯示ECP在果蠅胚胎發(fā)育的整個(gè)階段都持續(xù)廣泛的高表達(dá),因而ECP在果蠅中直接參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及細(xì)胞周期的可能性較小,主要在胞漿中發(fā)揮功能。為了闡明ECP的功能,我們構(gòu)建了轉(zhuǎn)基因果蠅模型,通過UAS/GAL4系統(tǒng)在特定的組織過表達(dá)或抑制ECP來觀察果蠅的表型。目前的結(jié)果表明,在果蠅的整體水平

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