葛花解酲方含藥血清對(duì)HepG2細(xì)胞增殖凋亡的作用及對(duì)C-myc基因表達(dá)的影響.pdf

1、研究目的:本課題是以HepG2細(xì)胞為研究對(duì)象，在前期研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)制備葛花解酲方含藥血清，觀察葛花解醒方對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2增殖和凋亡的作用，探討葛花解酲方含藥血清對(duì)HepG2細(xì)胞中C-myc基因表達(dá)的影響。
　　研究方法:實(shí)驗(yàn)用SD健康雄性大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)2天后，采用灌胃給藥法予葛花解酲方，5天后，腹主動(dòng)脈取血，2500r/Min離心20min后取上清液，56℃水浴鍋溫浴30分鐘滅活，超凈臺(tái)過(guò)濾分裝血清備用。15％的胎牛血

2、清常規(guī)培養(yǎng)HepG2細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)按照1*106/ml密度種植細(xì)胞，按照不同濃度(5％、10％、20％、40％)給予含藥血清，MTT法檢驗(yàn)細(xì)胞24h、48h、72h增值率;采用熒光實(shí)時(shí)定量法檢測(cè)不同濃度含藥血清的HepG2細(xì)胞中C-myc基因表達(dá)的情況;采用流式細(xì)胞儀法檢測(cè)不同濃度含藥血清的HepG2細(xì)胞的凋亡率。
　　研究結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比，40％葛花解酲方含藥血清24h、48h、72h細(xì)胞增值率分別從(0.67±0

3、.07)％、(0.54±0.01)％、(0.50±0.13)％下調(diào)為(0.49±0.05)％、(0.39±0.03)％、(0.33±0.08)％;(2)4h、12h、24h、48h細(xì)胞凋亡率分別為(34.08±0.95)％、(35.78±0.47)％、(37.53±0.42)％、(38.98±0.83)％，與對(duì)照組相比，其凋亡率均增高。結(jié)論:濃度為40％葛花解酲方含藥血清對(duì)HepG2細(xì)胞具有抑制其增殖促進(jìn)其凋亡的作用。(3)管家基因定量